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大豆花叶病毒CP基因原核表达与抗血清制备

陈文华;韦传宝;贾玉成;祁伟

  根据已报道的大豆花叶病毒(SMV)序列设计引物,扩增SMV的外壳蛋白(CP)基因,序列同源性分析结果表明,与目前已报道的SMV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为85.0%~96.8%,相应推测的氨基酸序列同源性为87.9%~98.9%。将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)PlysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Western blot分析对CP具有高度特异性。硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1∶3800的一抗,可用于田间SMV病样检测。……   
[关键词]:大豆花叶病毒;CP基因;原核表达;抗血清制备
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物技术通报2009年10期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)