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苏云金杆菌辅助蛋白P20对杀虫晶体蛋白Cry1Ab表达的影响

汤慕瑾;袁美妗;陈建武;师永霞;曾少灵;余健秀;庞义

  苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,简称Bt)杀虫晶体蛋白Cry1Ab因其C 半端缺少了一段含 4个半胱氨酸的氨基酸序列而导致蛋白的不稳定 ,报道苏云金杆菌辅助蛋白P2 0帮助Cry1Ab蛋白的表达及晶体的形成。利用穿梭载体pHT310 1构建 3个表达质粒 ,即pT1B、pP1B和pDP1B ,3个质粒都含有cry1Ab基因 ,不同在于pT1B没有p2 0基因 ,pP1B含有p2 0全基因 ,而pDP1B不仅含有p2 0全基因 ,且在p2 0基因前插入cry1A(c)启动子。分别将这 3个表达质粒经电转化到苏云金杆菌晶体缺陷型菌株CryB中 ,获得转化菌株T1B、P1B和DP1B。Westernblot表明cry1Ab基因在这 3株菌中均表达了 130kD的蛋白 ,部分降解为大约 6 0kD的蛋白。蛋白定量分析显示 ,3株菌 130kD蛋白量的比为 1∶1.4∶1 5 ,降解后的 6 0kD蛋白量的比为 1∶1.1∶1.6 ,Cry1Ab蛋白总量的比为 1∶1∶2∶1 6。镜检发现 ,Cry1Ab在 3株菌中都形成典型的菱形晶体 ,其晶体大小为T1B <P1B <DP1B。生物测定结果显示 ,3个菌株对棉铃虫 (Helicoverpaarmigera)均具有明显的杀虫活性 ,三者的LC50 差异不显著。研究表明 ,P2 0对cry1Ab基因的表达和晶体形成均有帮助 ,P2 0表达量的多少可能是导致Cry1Ab蛋白最终产量有所不同的因素……   
[关键词]:苏云金杆菌;p20基因;cry1Ab基因;表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物工程学报2003年05期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)