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应用CTB基因启动子及信号肽序列构建分泌性表达系统

曹诚;石成华;李平;马清钧

  利用霍乱毒素B亚基基因的启动子、信号肽序列及ctx操纵子的转录终止信号构建了分泌性表达的质粒载体pMC05S。β-半乳糖苷酶基因克隆至霍乱毒素B亚基基因的信号肽序列下游后能得到高效分泌性表达。不同的宿主菌和培养基成分中对β-半乳糖苷酶的表达产量有较大的影响,以MM2为宿主菌、在玉米浆培养基中β-半乳糖苷酶的表达产量达4100u/ml,产物的大部分分泌至细胞的周质;活力测定的结果与SDS-PAGE电泳测定结果基本一致,说明表达的β-半乳糖苷酶绝大部分都具有酶活性。构建的蛋白质分泌性表达的载体-宿主系统及合适的培养条件为易形成包含体的蛋白质的高效表达提供了一条新的途径。……   
[关键词]:霍乱毒素B亚基;信号肽;质粒;分泌;β-半乳糖苷酶
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《生物工程学报1995年02期