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双抗体夹心ELISA法检测海产蟹血卵涡鞭虫方法的初步建立

査智辉;施慧;谢建军;许文军;孙忠

  以针对血卵涡鞭虫的特异性单克隆抗体为捕获抗体,纯化的抗血卵涡鞭虫的兔抗血清为检测抗体,初步建立了检测血卵涡鞭虫的双抗体夹心ELISA方法。方阵滴定确定最佳反应条件:包被的单克隆抗体浓度为10μg/mL,多抗兔血清工作浓度为14.3μg/mL,待检样品稀释度为1:800;HRP-羊抗鼠IgG按1∶20 000稀释。用建立的ELISA方法对86份已知背景样品进行检测,阳性检出为97.6%,血卵涡鞭虫抗原检测的灵敏度为100 pg/mL;与蟹血淋巴细胞、假丝酵母菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等样本均无交叉反应。结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法灵敏度高、特异性强,可用于诊断梭子蟹乳化病血卵涡鞭虫病的检测。……   
[关键词]:血卵涡鞭虫;三疣梭子蟹;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA法
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《浙江海洋学院学报(自然科学版)2011年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)