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CTB-mST2融合蛋白在大肠杆菌表达及其生物活性鉴定

赵聪;张艳红;张部昌;马清钧

  目的:表达霍乱毒素B亚单位(CTB)和大肠杆菌突变的热稳定肠毒素(mST)的融合蛋白,并进行抗原性和免疫原性的分析。方法:通过连接肽(linker)将CTB基因和串连的mST连接,然后插入表达载体pET-22b(+),获得克隆,经IPTG诱导获得CTB-mST2融合蛋白。采用多因素正交优选法优化了培养基及培养条件,对表达产物进行包涵体复性后,经过亲合层析纯化得到融合蛋白,并对该融合蛋白抗原性和免疫原性进行了分析。结果与结论:构建了高效表达工程菌,经摇瓶培养,在优化培养基及培养条件下融合蛋白表达量可达320 mg/L,占总蛋白40%。融合蛋白免疫小鼠,可获得高滴度抗CTB和ST血清;将融合蛋白与灭活的O157∶H7菌体组合免疫小鼠,可产生对O157∶H7毒株攻击的保护力。本研究可为构建抗ETEC和EHEC复合疫苗提供依据。……   
[关键词]:霍乱毒素B亚单位;大肠杆菌热稳定肠毒素;大肠杆菌O157∶H7;疫苗
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《军事医学科学院院刊2007年03期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)