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人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的建立

包国强;马庆久;邢金良;杨向民;陈志南

  目的 建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库 ,经过扩增和筛选 ,得到目的抗体。方法 自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因 ,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中 ,建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库。然后利用肝癌抗原HAb18GE进行筛选 ,并对抗体库的扩增和筛选条件进行优化。结果 pComb3展示抗体库在 37℃进行扩增挽救时存在明显的目的片段重组丢失现象。pComb3X展示抗体库在不同的扩增条件下均未发现明显的重组丢失现象。经过 4轮筛选后 ,噬菌体展示抗体ELISA显示 ,鉴定克隆与原核表达GST及无关蛋白存在明显交叉反应 ,而改用诱导表达细菌裂解上清进行ELISA鉴定可以抑制交叉反应的发生。结论 通过建立杂合Fab抗体库 ,并对扩增和筛选条件进行优化 ,作者获得了目的抗体……   
[关键词]:抗体库;人源性;肝肿瘤
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《解放军医学杂志2004年05期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)