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胃癌相关基因GCRG213在大肠杆菌中的表达及重组蛋白纯化

伍银桥;王刚石;王孟薇;吴本俨;尤纬缔;王卫华

  目的 利用硫氧还蛋白融合表达系统表达胃癌相关基因GCRG2 13,制备高纯度的GCRG2 13蛋白。方法 采用PCR技术从pGEM T质粒上扩增出含完整ORF的GCRG2 13cDNA序列 ,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体 pET10 2 /D TOPO中 ,转化大肠杆菌BL2 1,经IPTG诱导表达融合蛋白 ,凝胶回收目的蛋白。结果 SDS PAGE证实在大肠杆菌中高效表达出相对分子量约 2 9 4kD的Thioredoxin/GCRG2 13融合蛋白。薄层凝胶扫描显示 ,其表达量占菌体总蛋白的 2 8 7%。经凝胶回收法得到纯度近 10 0 %的蛋白产品。结论 在大肠杆菌中成功表达了Thioredoxin/GCRG2 13融合蛋白 ,并制备出高纯度蛋白产品 ,为后续的功能研究及其抗体研制奠定了基础……   
[关键词]:胃肿瘤;基因;GCRG213;融合蛋白;原核表达;纯化
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《解放军医学杂志2004年05期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)