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乙型肝炎病毒X蛋白上调S100钙结合蛋白A11基因启动子表达活性研究

洪源;成军;杨倩;刘妍;王建军

  目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV)X蛋白 (HBV X蛋白 )对S10 0钙结合蛋白A11(calgizzarinS10 0A11)启动子转录的激活作用。方法 以解放军第 30 2医院基因治疗研究中心自行构建的HBV X蛋白反式调节基因的cDNA文库抑制性消减杂交 (SSH)技术的筛选结果及基因表达谱芯片结果为基础 ,利用生物信息学技术确定S10 0A11的启动子区域 (S10 0A11 p) ,聚合酶链反应 (PCR)扩增S10 0A11 p,克隆至真核报告载体pCAT3中 ,构建pCAT3 S10 0p报告载体 ;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达活性 ;并与pcDNA3.1( )X共转染HepG2细胞系 ,用ELISA法检测CAT的表达活性。结果 pCAT3 S10 0p在HepG2细胞中能够指导CAT的表达 ;共转染实验中pCAT3 S10 0p+pcDNA3.1( )X组CAT的表达活性是pCAT3 S10 0p的 2 .1倍。结论 所克隆的S10 0A11启动子有顺式激活下游基因的活性作用 ;HBV的X蛋白具有对S10 0A11的反式激活作用。本实验进一步验证了解放军第 30 2医院基因治疗研究中心利用SSH技术及基因表达谱技术研究HBV X蛋白反式激活作用的结果……   
[关键词]:肝炎病毒;乙型;启动子;反式激活
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《解放军医学杂志2004年05期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)