手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

乙型肝炎病毒核心启动子区基因异质性及对其转录活性的影响

刘妍;董菁;皇甫竞坤;成军;韩萍;牟劲松;李克;钟彦伟

  从慢性乙型肝炎病毒 (HBV)感染患者外周血中扩增核心启动子 (CP)基因序列 ,克隆入pGEM Teasy质粒 ,随机挑选克隆进行DNA测序以确定病毒的变异程度。结果提示 ,HBV长期携带者体内有准种共存 ,CP区内存在热点缺失突变及散在点突变。为了进一步探讨CP区基因异质性对其转录活性的影响 ,将野生株及不同缺失突变的CP基因片段克隆入pcDNA3 1( )载体的EcoRI位点 ,筛选反向克隆 ,经KpnI和XhoI双酶切后克隆入氯霉素乙酰转移酶 (CAT )报告基因表达载体pCAT3 basic上 ,构建重组报告质粒。以Lipofec taminePLUS转染试剂转染肝母细胞瘤细胞系HepG2 ,用ELISA方法检测CAT表达量 ,反映了CAT基因上游启动子的转录活性。结果显示 ,成功构建了重组报告质粒 ,与野生株比较 ,HBVCP区准种群的存在不同程度地降低了CP基因的转录活性。……   
[关键词]:肝炎病毒;乙型;核心启动子;异质性;报告基因;转染
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《解放军医学杂志2002年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)