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植物细胞DNA片段能诱导爪蟾卵提取物实现体外核重建

张博;陈英;翟中和

  用植物细胞DNA片段在动物(非洲爪蟾)来源的卵提取物中实现了非细胞体系核重建.用酶解、低渗溶胀等温和方法抽提得到悬浮培养的胡萝卜细胞核DNA片段,以一定的比例加入新制备的爪蟾卵提取物,DNA特异荧光染料DAPI染色观察显示,这些DNA片段逐步凝集缠绕成染色质样结构,然后进一步去凝集、弥散化参与形成核结构.电子显微镜超薄切片观察显示这些染色质样结构与由LambdaDNA诱导形成的相似.~3H-dTTP与α-~32p-dCTP掺入重建核的液闪计数结果表明,由植物细胞DNA片段诱导形成的重建核有一定的DNA复制活性.……