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黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达和分泌

李文清;何鸣;罗进贤

  将黑曲霉葡萄糖淀粉酶GAI的cDNA插入到质粒pMA91的酵母PGK基因的启动子和终止序列之间,构成含葡萄糖淀粉酶基因的表达载体pMAG69。用原生质体转化法引入酿酒酵母GRF18,实现黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达,利用基因本身的信号序列使99%以上的酶蛋白分泌至胞外,构建的酵母菌株在含10%淀粉的培养基中2天内能水解87%的淀粉,对酵母转化子的稳定性检测显示,重组质粒pMAG69可在酿酒酵母中较稳定地存在。……