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λDNA限制片段上的基因在大肠杆菌中的表达

匡达人;何俊坤;居其达;龚启蕙;王妙珠;朱心良

  我们用EcoRI及BamHI两种限制性核酸内切酶来酶解质粒pBR322成为pBR322C(375bp)及pBR322B(3987bp),并同样酶解λc1857S_7 DNA的EcoRI限制片段λF_2(λDNA的65.5—81%片段)成为λF_2A(DNA的65.6—71.3%片段,2679bp)及λF_2B(λDNA的71.3—81%片段,4559bp).再用T_4-DNA连接酶将pBR322B及λF_2B重组成为一个新质粒,叫做pCB_2,其上具有cI基因,cro基因及启动基因.这是从随机挑取的338个菌落中筛选出来的第48号菌.pCB_2赋予转化子以单抗药性(Ap~r)及对λcI_(857)S_7感染的免疫性.用电子显微镜及凝胶电泳测定,pCB_2 DNA分子长度为2.66±0.33微米,分子量为5.51±0.68×10~6d.用λF_2与Eco RI切割成线状的pCB_2在一起形成的异源双链图形和以上数据.都说明这一新质粒与建造时的设计相符.其中的cI基因及/或cro基因在大肠杆菌中得到表达.……   
[关键词]:DNA;EcoRI;电子显微镜;PBR;凝胶电泳;启动基因;噬菌体;大肠杆菌
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国科学1980年11期