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苏云金芽孢杆菌cry3Aa启动子的克隆和营养期表达载体的构建

余健秀;蒙国基;曾少灵;谢瑞瑜;谭乐;庞义

  苏云金芽孢杆菌 (Bacillusthuringiensis ,Bt)的绝大多数杀虫晶体蛋白 (insectici dalcrystalproteins,ICPs)基因是在芽孢形成期 (sporulationphase)表达的 ,而只有少数基因如cry3Aa是在营养期表达的。在本研究中 ,根据已知的cry3Aa基因启动子序列设计了一对引物 (Ep 5s和Ep 3n) ,利用这对引物从拟步虫甲亚种 (Btsubsp .tenebrions)中扩增出一个与预期大小 ( 1.1kb)一致的DNA片段。序列测定及分析结果表明 ,这个DNA片段含cry3Aa启动子全序列 ,包括上游AT富含区、两个启动子区、两个SD序列及两组反向重复序列。经过一系列的克隆之后将这个片段克隆到穿梭载体pHT310 1上 ,最后构建成一个Bt的营养期表达载体 pHPT。……   
[关键词]:苏云金芽孢杆菌;cry3Aa基因;启动子;营养期表达载体
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《高技术通讯2001年03期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)