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脱氧核酶对端粒酶RNA的切割和乳腺癌细胞凋亡相关基因表达的作用

赵家明;李明意;杨展;李震;张毅

  目的探讨脱氧核酶对端粒酶RNA组分(hTR)的切割作用及对人乳腺癌细胞凋亡相关基因bcl-2和bax表达的影响。方法针对hTR基因的核苷酸序列,合成“10~23”型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割hTRRNA;转染乳腺细胞后,用RT-PCR扩增hTR基因片段,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性,用RT-PCR和荧光免疫测定凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3 末段添加倒位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割hTRRNA;在转染乳腺癌细胞后,DzTi比DzT对hTRRNA表现出更强的切割作用,DzTi能够显著地降低乳腺癌细胞端粒酶活性(P<0.05),但对乳腺癌细胞的生长和细胞凋亡相关基因bcl-2和bax基因没有明显的影响(P>0.05)。DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT 和DzTi 在胞外和胞内均不表现对hTRRNA的切割作用。结论人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割端粒酶hTRRNA,并降低乳腺癌细胞的端粒酶活性。作为一种新发现的催化性核酸,脱氧核酶在肿瘤的基因治疗领域中可能具有极其重要的应用价值。……   
[关键词]:催化性DNA;端粒酶;乳腺肿瘤;bcl-2;bax
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《第一军医大学学报2005年06期