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乙型肝炎病毒全基因在肝癌细胞中的转染与表达

倪宏;骆抗先;朱幼芙;张明霞;吴英松;马佩球;朱科伦

  目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)复制状态模型。方法 体外连接HBV DNA获得6.4 kb的双拷贝DNA片段,然后将其插入pcDNA3载体的Eco RV位点,通过聚合酶链反应(PCR)和酶切筛选获得头尾串联双拷贝HBV全基因重组真核表达质粒,再通过脂质体介导法转染肝癌细胞。结果 通过G418筛选,对阳性克隆细胞进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析,证明已将HBV全基因重组真核表达质粒转染至肝癌细胞并获得稳定表达。结论 通过脂质体介导法将HBV全基因转染至肝癌细胞,成功建立了HBV复制状态的细胞模型。……   
[关键词]:乙型肝炎病毒;基因重组;基因;病毒;基因表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《第一军医大学学报2001年07期