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重组真核质粒pCMV4-rZP3′构建及在小鼠体内的表达

周飞;杨颖;彭景楩

  选取兔透明带ZPC基因序列的部分片段 (编码 2 634 1 5位的氨基酸 ,rZP3′)作为靶抗原 ,构建兔ZP3′基因疫苗 ,研究其阻断受精的效果。提取成熟雌兔卵巢的总RNA ,RT PCR克隆兔透明带ZPC的cD NA ,直接插入到克隆质粒PCR○R 21中 ,构建克隆质粒PCR○R 21rZPC′,再将靶片段用HindⅢ、X bal双酶切从克隆质粒PCR○R 21rZPC′切下 ,1 %的低熔点琼脂糖电泳回收 ,亚克隆到真核表达质粒pCMV4中 ,构建真核表达质粒pCMV4rZPC′。将质粒直接注射到活体小鼠的大腿内侧肌肉中 ,在mRNA水平上观察到质粒能在肌肉细胞中正确表达 ,并且其表达可以维持 1 2周以上。……   
[关键词]:DNA疫苗;卵透明带;ZPC;RT-PCR
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《动物学杂志2001年03期