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同时表达多种外源基因的非复制型重组痘苗病毒的构建

马海伦;孙朝晖;陆柔剑;娄元梅;郭斐;张帆;阮力

  利用非复制型痘苗病毒载体,构建了能同时表达乙型肝炎(乙肝)病毒SS1、麻疹病毒HA和F及白细胞介素2(IL2)的非复制型重组痘苗病毒VHFIL2ΔCKSS1,及其相应的复制型重组痘苗病毒VHFIL2SS1。这两株重组病毒在CEF细胞上连续传至第25代,经Southernblot证实,两株病毒均在A24、A27间稳定整合有SS1基因,非复制型重组病毒C、K间基因稳定缺失。经RIA、ELISA及Westernblot方法检测,这两株病毒均可稳定分泌表达SS1蛋白,其分泌表达的SS1蛋白与CHO细胞表达的SS1蛋白性质相近,接近于天然。经免疫打点检测,两株病毒均可稳定表达麻疹病毒的HA与F蛋白以及IL2。而且VHFIL2ΔCKSS1与VHFIL2SS1表达多种外源抗原的水平无显著性差异。VHFIL2ΔCKSS1经皮内注射免疫家兔,4周后可诱发抗乙肝病毒SS1、抗麻疹病毒及抗痘苗病毒的特异性IgG抗体;加强免疫2周后,特异性抗体滴度可上升4~16倍,与其初始病毒VHFIL2ΔCK诱发的抗体水平相同,比VHFIL2SS1诱发的抗体滴度低0~4倍。非复制型多价重组痘苗病毒的构建,为评价非复制型痘苗病毒载体作为多价疫苗载?……   
[关键词]:多价疫苗;非复制型痘苗病毒载体;遗传稳定性;免疫效果
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《病毒学报1999年01期