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乙型肝炎病毒PreS2蛋白在大肠杆菌中的表达

曾庆;金冬雁;周园;侯云德

  通过融合乙型肝炎病毒(HBV)PreS2基因及大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因,使HBVPreS2蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,推算所表达的融合蛋白占菌体可溶性蛋白的15%左右。经检测表明,表达产物可与抗PreS2单克隆和多克隆抗体反应,并能与多聚人血清白蛋白相结合,同时还具有较强的β-半乳糖苷酶活性,可用于抗PreS2抗体的血清学诊断。利用β-半乳糖苷酶底物类似物亲和层析的方法对融合蛋白进行一步纯化,通过Western印迹及N端氨基酸测序对纯化产物进行鉴定,表明虽然在裂解细菌的同时已加入蛋白酶抑制剂,但仍有相当一部分(>50%)的融合蛋白已在PreS2与β-半乳糖苷酶之间发生断裂,对此现象进行了讨论。……