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骨形态发生蛋白在大肠杆菌中表达的研究

黄军荣

  目的骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是一种具有诱导活性的酸性糖蛋白,在组织工程研究和临床应用上需求量较大,BMP-2在组织中含量较微,利用基因工程方法生产重组BMP-2显得尤为重要。方法本研究根据人骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)基因序列设计出引物,以克隆载体质粒pBR322-BMP-2为模板,得到BMP-2基因并重组入原核表达载体pGEX-4T-1中,将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定并用Western bloting检测。结果SDS-PAGE显示,得到40 KD的目的蛋白,表达量可达菌体总蛋白的15.2%,Western bloting检测表明,抗BMP-2单抗可与相对分子量40 KD大小的电泳条带发生特异性反应,从而证明表达产物具有目的蛋白构型。结论本研究为进一步研究利用原核表达系统大量生产BMP-2打下基础。……   
[关键词]:骨形态发生蛋白;基因;大肠杆菌
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《安徽医药2009年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)