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Damas1869李离体繁殖及再生体系建立

许建兰

   Damas1869李是法国农科院波尔多农业研究中心培育的砧木品种,具有较好的抗涝性,且与大部分桃嫁接亲和性良好。为此建立了稳定高效的Damas1869李离体快繁体系,并在此基础上,研究了不同因素对不定芽的影响,以建立高效的再生技术体系,为遗传转化和创新种质研究奠定基础。主要结果如下: 1.离体快繁 ①用冬季及春季两种不同来源的Damas1869李的芽进行比较试验,结果表明,以冬季休眠枝条的水培嫩芽为外植体材料较好,成活率为64.0%;最佳灭菌方法是75%酒精消毒10s,再20%NaClO消毒8m,创建无菌体系。 ②最佳芽增殖培养条件是MS + 6-BA1.0mg/L + NAA0.5mg/L + 20.0g/L蔗糖+ 5.0g/L琼脂粉,培养室温度为25±1℃,光照强度2000Lx,光照时间14h/d,增殖系数最高可达7.1。 ③最适宜生根培养基是1/2MS + IBA 2.0mg/L + 20.0g/L蔗糖+ 5.0g/L琼脂粉+ 0.05%活性炭,生根率为87.8%,平均生根数3.9。 ④移栽时增殖苗先在低浓度激素条件下连续继代2次,选用株高大于4cm的苗,移栽到草炭土:珍珠岩:蛭石=1:1:1(体积比)的基质中,移栽后7d内用塑料薄膜覆盖保湿,7d后逐渐揭膜透气,最高成活率可达90%。 2.叶片再生 以Damas1869李试管苗幼嫩叶片为试材,采用正交试验设计,对影响离体叶片再生的基本培养基、外源细胞分裂素(TDZ、6-BA)和生长素(IBA、NAA)浓度组合、培养基中琼脂用量和叶片生理状态等方面的关键因素进行了研究。结果表明: ①Damas1869李试管苗幼嫩叶片以F14基本培养基再生效果最好,优于MS和WPM培养基。 ②最佳激素配比是TDZ4.0mg/L + IBA0.5 mg/L,以继代增殖幼嫩叶片再生能力最高。 ③以5d的暗培养后光照培养,4.5g/L琼脂配制偏软的再生培养基有利于提高离体叶片的再生效率。所建立的Damas1869李试管苗幼嫩叶片高效离体再生技术体系,再生率可保持在73.5%左右,平均每叶再生3~5个芽。……   
[关键词]:Damas1869李;组织培养;快繁体系;再生体系
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:扬州大学2010年