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山羊卵泡BMPRⅡ基因的定位表达及其体外培养

吴曼

   本试验采用免疫组化和实时荧光定量PCR技术,检测了骨形态发生蛋白受体II(BMPRII)在山羊卵泡中的定位及在体外培养过程中BMPRII mRNA的相对表达丰度,探讨了BMPRII基因对卵母细胞体外成熟的影响,旨在为研究BMPRII基因的生物学功能提供理论依据。此外,试验优化了山羊卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精体系,旨在为进一步完善山羊胚胎体外生产体系提供实验依据。结果表明: 1. BMPRII mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体在体外成熟全过程中均有表达,且呈现先升高后降低的趋势,其表达峰值出现在IVM 12h,与卵丘开始扩散的时间一致。 2. BMPRII的表达,卵母细胞与卵泡液中均呈强阳性信号,而各级卵泡中的卵泡细胞BMPRII的表达相对较弱。 3.本研究结果提示BMPRII可能在山羊卵母细胞体外成熟和卵丘细胞扩散中可能起着重要作用,并可进一步证明BMPRII也同样是BMP15和GDF9的受体。 4.在体外培养体系中,不同浓度血清(10%、15%、20%)、成熟时间(24h、27h)对卵母细胞的体外成熟影响不大(P>0.05);而采卵的卵巢直径对卵母细胞的体外成熟影响显著(P<0.05); 5.卵母细胞成熟时间(24h、27h)对受精率的影响不显著(P>0.05),而采卵时,卵丘细胞的有无对卵母细胞的体外成熟影响差异极显著(P<0.01),卵泡细胞的去除对受精率的影响显著(P<0.05)。……   
[关键词]:山羊;卵泡;BMPRII基因;实时荧光定量PCR;免疫组化;体外培养
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:扬州大学2010年