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双酚A对子宫肌瘤细胞体外增殖的研究

刘涛

   目的: 通过研究环境雌激素双酚A (bisphenol A, BPA)对体外培养的人子宫肌瘤细胞增殖的影响,及其对ERmRNA, IGFmRNA, VEGFmRNA表达的影响,来探讨双酚A能否促进子宫肌瘤的生长,及其可能的作用机制,为子宫肌瘤的预防及治疗提供实验依据。方法: 应用胶原酶消化法分离、获得子宫肌瘤细胞,免疫细胞化学SABC法进行细胞学鉴定。用不同浓度双酚A(25×10-7mol/L,50×10-7mol/L,100×10-7mol/L)干预后,分别于0、24、48、72h应用MTT法检测细胞的增殖活性,同时为后续研究筛选出有效作用时间点;应用RT-PCR检测经不同浓度BPA干预后的各组肌瘤细胞的ERmRNA, IGFmRNA, VEGFmRNA的表达情况。 结果: 1.成功培养了人子宫肌瘤细胞,并经免疫细胞化学鉴定证实。 2.各组子宫肌瘤细胞的体外生长曲线形态良好,溶剂对照组与子宫肌瘤组相比较,差异无显著性(P>0.05)。BPA以剂量-时间依赖性的方式促进子宫肌瘤细胞的增殖。作用24h时效果不明显(P>0.05),48h时开始稳步性升高(P<0.05),72h时增殖效应最显著(P<0.01)。故在后续实验中选取72h为研究的有效作用时间点。25×10-7mol/LBPA组对肌瘤细胞ERmRNA, IGFmRNA, VEGFmRNA的表达无明显影响,在体外促进细胞增殖的作用微弱(P>0.05); BPA浓度为50×10-7mol/L时,肌瘤细胞ERmRNA, IGFmRNA, VEGFmRNA的表达显著上升,细胞的增殖活力也相应的上升(P<0.05);当浓度达100×10-7mol/L时,ERmRNA, IGFmRNA, VEGFmRNA的表达进一步上升,肌瘤细胞的体外增殖能力显著上升(P<0.05)。 结论: 1.BPA能够增加肌瘤细胞体外增殖活性,且存在着剂量-时间依赖性。 2.ERmRNA, IGFmRNA及VEGFmRNA在子宫肌瘤中高表达,诱导细胞异常增殖。 3.用BPA干预后,增加了肌瘤细胞ERmRNA, IGFmRNA和VEGFmRNA的表达水平,增加了肌瘤细胞的增殖活性,且对BPA呈时间和浓度依赖性。……   
[关键词]:环境雌激素;双酚A;子宫肌瘤
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:山西医科大学2010年