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慢病毒介导的靶向血管生成素2的siRNA对人胰腺癌PANC-Ⅰ抑制作用的体外研究

徐德华

   目的观察携带靶向血管生成素2基因的siRNA的慢病毒对体外培养的人胰腺癌PANC-1细胞血管生成及侵袭能力作用的影响。 方法将LV-Ang2-siRNA转染入人胰腺癌细胞株PANC-1中,以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,用荧光显微镜和流式细胞仪观察病毒转染效率。用逆转录聚合酶连反应检测PANC-1细胞Ang2-mRNA和蛋白表达,MTT法及流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,鸡胚及侵袭实验检测肿瘤血管生成及转移侵袭能力。 结果LV- Ang2-siRNA被成功地转染入PANC-1细胞中,FCM检测转染效率95%以上。与阴性对照组和空白对照组比较,实验组PANC-1细胞的Ang2 mRNA和蛋白的表达明显受到抑制。实验组的细胞转移侵袭能力明显下降且肿瘤血管生成明显减少,差异有显著性统计学意义(P<0.05)。三组细胞的凋亡率均较低,组间差异无明显统计学意义(P>0.05)。 结论LV对PANC-1细胞有较好的转染能力,可介导外源基因在PANC-1中表达。LV- Ang2-siRNA转染PANC-1细胞后能降低PANC-1细胞株Ang2mRNA及蛋白的表达,明显降低肿瘤的侵袭能力及抑制肿瘤的血管生成,但对其增殖凋亡的抑制无明显作用。……   
[关键词]:胰腺癌;Ang2;RNA干扰;小干扰RNA;慢病毒;CAM;基因治疗
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:苏州大学2010年