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芥菜离体培养芽再生过程中的生理生化变化研究

蒋波

   本试验以芥菜(Brassica juncea Coss.)的三个品种:四川榨菜、金研一号香菜、圆大头菜为实验材料,建立了三个品种的子叶离体培养体系。对三个品种子叶离体培养芽再生过程中的生理生化指标变化(可溶性蛋白、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、可溶性糖、淀粉、核酸)和可溶性蛋白组分以及过氧化物酶同工酶进行了比较研究,实验结果如下: 1.四川榨菜、金研一号香菜、圆大头菜的子叶在培养基MS+NAA0.1mg/L+6-B A3. Omg/L上均得到最高分化率,分化率分别为:83%、76%、51%。 2.选择培养基MS+NAA0.1mg/L+6-BA3.0mg/L+2,4-D0. 1mg/L为金研一号愈伤组织的诱导培养基,子叶愈伤组织诱导率为93%。愈伤组织的最适增殖培养基为MS+NAA0.3mg/L+6-BA3.0mg/L+2,4-D0.1 mg/L.愈伤组织最适分化培养基为MS+NAAO.1 mg/L+6-BA3.0mg/L,愈伤分化率为13%。 3.在四川榨菜、金研一号香菜、圆大头菜子叶离体培养芽再生过程中,三个品种在抗氧化酶(POD. SOD、CAT)活性以及可溶性糖含量、淀粉含量和RNA含量上的变化规律基本一致,只是在分化过程中品种间表现略有差异,其中四川榨菜先分化出芽,先于另外两个品种出现变化的峰值,同时由于四川榨菜和金研一号香菜分化率高,代谢活跃,各个生理生化指标变化趋势也比圆大头菜剧烈。而可溶性蛋白含量和DNA含量的变化上,金研一号香菜因直接形成芽丛,因此在含量上出现了与其他两个品种不同的变化趋势。如在培养8天时,金研一号香菜的可溶性蛋白含量和DNA含量有小幅上升,其他两个品种则呈下降趋势。 4.三个品种在分化过程中,在不同的培养阶段,都各自有不同的特异蛋白条带和POD同工酶谱的出现和消失。 四川榨菜愈伤组织分化时有55KDa、30KDa、31KDa、18KDa蛋白组分表达,57KDa、38KDa、28KDa、12KDa蛋白组分消失;金研一号香菜子叶分化时有55KDa、14KDa蛋白组分表达,而57KDa、34KDa、26KDa、12KDa蛋白组分则被关闭;圆大头菜子叶培养16d愈伤组织分化时,55KDa蛋白组分表达,但12KDa蛋白组分被关闭。三个芥菜品种分化时都有12KDa蛋白条带的消失,12KDa蛋白条带的消失可以作为分化的标志之一 三个芥菜品种的子叶含有相同的POD同工酶谱带。四川榨菜子叶分化时,B带消失,而C、D、E带活性进一步增强;金研一号香菜子叶分化时A带出现,含有A、B、C、D、E五条带;圆大头菜子叶分化时,A、C带出现,也含有A、B、C、D、E五条带。 5.主成分分析结果表明,POD、CAT、SOD、可溶性糖、可溶性蛋白含量和DNA含量6个指标可以反映芥菜子叶离体培养芽再生过程。……   
[关键词]:芥菜;组织培养;生理生化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:西南大学2010年
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