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瑞香素抗肿瘤及免疫调节作用研究

舒奇

   目的:探讨瑞香素的体内、外抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响,为瑞香素的药用开发提供科学依据。 方法: 1.金边瑞香提取物---E002(瑞香黄烷-Ⅰ)、E003(瑞香素)体外抑瘤实验,采用MTT法检测不同浓度E002、E003对人肝癌SMMC-7721细胞和人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响;2.瑞香素对荷瘤小鼠体内抑瘤实验及免疫功能的影响:①建立荷S180瘤小鼠模型;②动物分组及用药:随机分为6组a)健康对照组;b)瑞香素高剂量组(4mg/kg);c)瑞香素中剂量组(2mg/kg);d)瑞香素低剂量组(1mg/kg);e)荷瘤对照组;f)环磷酰胺组(100mg/kg)。瑞香素各剂量组每鼠每天腹腔注射不同剂量瑞香素0.2ml,共10天;环磷酰胺组每鼠分别于第1、5、9天腹腔注射100mg/kg CY(环磷酰胺)0.2ml。荷瘤对照组和健康对照组每鼠每天腹腔注射生理盐水0.2ml ,共10天;③检测如下指标:a)荷S180瘤小鼠体内抑瘤作用,解剖分离皮下瘤块,称重,计算抑瘤率;b)RT-PCR法检测瑞香素对荷瘤小鼠细胞因子IL-2和IL-4mRNA表达的影响;c) MTT法检测瑞香素对荷瘤小鼠NK和LAK细胞活性的影响;d)MTT法检测瑞香素对ConA诱导的荷瘤小鼠脾T淋巴细胞增殖的影响;e)红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)法检测瑞香素对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响。 结果:1.①E002 (瑞香黄烷-Ⅰ)、E003(瑞香素)浓度(μg/ml)为:250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.90、1.95时,作用SMMC-7721细胞,E002抑制率(%)分别为:85.13±3.72、83.06±0.56、80.88±1.67、74.23±1.12、67.63±0.90、62.58±1.09、56.15±1.68、50.8±0.63;E003抑制率(%)分别为:86.9±2.23、83.4±2.47、80.35±2.22、78.01±0.41、74.53±3.46、69.05±2.83、60.01±2.68、51.46±1.63;②E002浓度(μg/ml)为:250、125、62.5时,作用于MCF-7细胞,E002抑制率(%)分别为:72.3±2.10、54.31±2.43、52.48±1.65;E003对MCF-7细胞增殖抑制作用不明显;③E002作用于SMMC-7721和MCF-7细胞的IC50值(μg/ml)分别为:1.96±0.03和22.89±3.04;E003作用于SMMC-7721细胞的IC50值(μg/ml)为:1.23±0.11;2.瑞香素高、中、低剂量组瘤重均显著低于荷瘤对照组(P<0.05);瑞香素高、中、低剂量组均能明显抑制肿瘤生长,抑瘤率分别为80.28%、71.18%、41.19%,抑瘤率随瑞香素剂量的增加而增高;3.瑞香素高、中剂量组细胞因子IL-2mRNA表达量显著高于荷瘤对照组(P<0.05),而IL-4mRNA表达量则显著低于荷瘤对照组(P<0.05);荷瘤对照组与健康对照组比,IL-2mRNA的表达量下降,而IL-4mRNA的表达量升高,呈现出Th2型为主的应答状态;环磷酰胺组与荷瘤对照组比较,IL-2mRNA表达量无显著性差异(P﹥0.05)。4.瑞香素高、中、低剂量组NK、LAK细胞杀伤率显著高于荷瘤对照组和环磷酰胺组(P<0.05);高剂量组与健康对照组比无显著性差异(P >0.05);环磷酰胺组则大大降低了NK、LAK细胞杀伤活性,显著低于健康对照组和荷瘤对照组(P<0.05)。5.瑞香素高、中、低剂量组ConA诱导的T淋巴细胞增殖刺激指数显著高于荷瘤对照组和环磷酰胺组(P<0.05);环磷酰胺组则明显降低了ConA诱导的T淋巴细胞增殖刺激指数,显著低于荷瘤对照组和健康对照组(P<0.05)。6.瑞香素高、中剂量组明显提高了红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR),与荷瘤对照组和环磷酰胺组比有显著性差异(P<0.05),其中高剂量组与健康对照组比无显著性差异(P>0.05);而环磷酰胺组则降低了红细胞C3b受体花环率,显著低于健康对照组(P<0.05),与荷瘤对照组比无显著性差异(P>0.05)。 结论:本研究首次对金边瑞香提取物E002(瑞香黄烷-Ⅰ)抗肿瘤作用和E003(瑞香素)体内抗肿瘤作用进行研究。1. E002金边瑞香提取物:瑞香素和瑞香黄烷-Ⅰ在0.12~250μg/ml范围内对体外生长的SMMC-7721细胞生长均有不同程度的抑制作用,且呈现良好的剂量依赖性;瑞香黄烷-Ⅰ在0.12~250μg/ml范围内对体外生长的MCF-7细胞生长有抑制作用,亦呈现良好的剂量依赖性。2.瑞香素在2~4 mg/kg?d剂量范围内能明显增强荷瘤小鼠细胞因子IL-2 mRNA的表达量,同时降低IL-4mRNA的表达量,在一定程度上改善了荷瘤造成的机体Th1/Th2型偏移状态。3.瑞香素在1~4 mg/kg?d剂量范围内对小鼠移植性肿瘤S180有明显的抑制作用;同时能明显增强荷S180瘤小鼠的细胞免疫、非特异性免疫和红细胞免疫功能。……   
[关键词]:瑞香素;肿瘤细胞;免疫功能;抗肿瘤作用;细胞因子
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南昌大学2009年
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