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积雪草苷的生物转化和深绿卷柏化学成分的初步研究

张焱

   积雪草酸是积雪草所含的许多五环三萜类化合物的苷元。近年来经过研究发现,这些积雪草所含苷类的活性与苷元由直接的关系。本研究以积雪草苷为底物,利用微生物转化法生产积雪草酸,用硅胶柱分离提取积雪草酸,并用核磁共振对其结构进行了确认。 为了得到能对积雪草苷进行生物转化使之成为积雪草酸的菌株,我们对三种备选菌株进行了筛选。实验发现经过筛选的黑曲霉的具有转化能力。为了提高黑曲霉对积雪草苷转化生成积雪草酸的产率,实验对黑曲霉的培养条件进行了研究,确定了培养条件的初始pH值为5,培养时间为6天,底物浓度为0.5mg/mL,葡萄糖浓度8g/L,蛋白胨加入量5g/L,KH2PO4的加入量为5g/L,培养温度为28℃,MgSO4·7H2O 1g/L,MnSO4·4H2O 1g/L,NaCl 5g/L。 在此基础之上,我们进行了发酵罐培养的初步研究,经过优化试验得到的结果和摇瓶发酵的结果相当。证明此方法确有可行性。 深绿卷柏(Selaginella doederleinii Hieron)是一种在我国南方部分地区广泛使用的民间药材。深绿卷柏具有具有祛风、散寒、消肿、止咳之功效,临床上多用于风湿病,风寒咳嗽。深绿卷柏的主要化学成分为黄酮类化合物。 本文对深绿卷柏全草的化学成分研究。采用多种分离技术对深绿卷柏的化学成分进行分离,从深绿卷柏中共分离得到20种化合物。根据其理化性质、运用~1H-NMR,~(13)C-NMR等波谱方法,以及参考文献报道的数据,鉴定出其中12种成分,其中4个化合物(robustaflavone4 ,4-o-dimethyl ether,robustaflavone7, 4 ,7-o-trimethyl ether,Podocarpusflavone A,3β-Acetoxysitost-5-en-7-one)为首次从该植物分离得到。用水蒸气蒸馏法提取了深绿卷柏的挥发油成分,并用GC-MS对挥发油成分进行分析,共分离鉴定出40种挥发性成分的结构。将深绿卷柏中挥发油的主要成分与报道的另外两种卷柏科植物的挥发油成分进行了比较,发现其中有非常大的差别,这些差别应该是由于物种的不同引起的,可以作为对卷柏科卷柏属不同种植物之间的亲缘关系进行判别的辅助依据。……   
[关键词]:积雪草苷;生物转化;积雪草酸;深绿卷柏;化合物;挥发油
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:天津大学2007年
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