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超短波对大鼠视神经再生的作用

刘辉

   目的 观察大鼠视神经夹伤后对闪光视觉诱发电位(F-VEP)的影响及睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)、睫状神经营养因子受体(ciliaryneurotrophic factor recepter,CNTFR)、脑源性神经营养(细胞诱向)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte myelin glycoprotein,OMgp)mRNA在视网膜中的表达变化。观察大鼠视网膜及视神经中脑源性神经营养因子的分布情况。探讨超短波对视神经钳夹伤大鼠神经再生的影响。 方法 本实验将大鼠分为3组,即视神经对照组(只暴露视神经而不损伤视神经),视神经损伤组(暴露并损伤大鼠视神经)和超短波治疗组(建立模型与视神经损伤组相同,损伤后用超短波治疗)。采用动脉瘤夹夹持视神经方法建立大鼠视神经不完全损伤模型,成功建立模型后超短波治疗组大鼠用超短波治疗20天(每次每只7分钟,治疗的输出功率为40W,工作频率43MHz),在1d,7d,14d,28d动态观测对照组,视神经损伤组,超短波治疗组大鼠F-VEP波形的变化,测量超短波治疗组F-VEP波的潜时及峰峰值并与视神经损伤组,视神经对照组大鼠波形进行比较。在28d剥离视网膜,提取总RNA用半定量逆转录聚合酶反应(rt-PCR)方法测定视网膜中CNTF,CNTFR,BDNF,OMgpmRNA的表达并用半定量的方法比较超短波治疗组与对照组,治疗组与损伤组,损伤组与对照组的表达情况。建立模型28d后用免疫组化方法观察对照组,视神经损伤组,治疗组大鼠视网膜及视神经中BDNF的分布情况。 结果 视神经损伤后F-VEP潜伏期延长,波幅降低,波形低而宽,14d最为明显之后有恢复迹象。超短波治疗组与视神经损伤组F-VEP差别不显著(p>0.01),超短波治疗组与对照组F-VEP差别显著(p<0.01),视神经损伤组与对照组差别亦显著(p<0.01)。大鼠视神经损伤后视网膜中CNTF,CNTFR,BDNF,OMgpmRNA均有所增加,正常大鼠视网膜中CNTF,CNTFR,BDNF,OMgpmRNA就有少量表达。治疗组大鼠BDNFmRNA与损伤组大鼠比较有显著性差异(p<0.01),而治疗组CNTF,CNTFR,OMgpmRNA与损伤组大鼠比较没有统计学意义(p>0.01)。免疫组化显示损伤后脑源性神经生长因子(BDNF)主要分布在内核层及外核层内侧。 结论 F-VEP的振幅,潜时伤后变化与时间相关,伤后14d变化最明显,以后有恢复迹象。大鼠视神经损伤后CNTF,CNTFR,BDNF,OMgpmRNA表达均增加,而CNTFR的增加可为外源性CNTF治疗视神经损伤提供依据。脑源性神经生长因子(BDNF)主要分布在内核层及外核层内侧。由于F-VEP记录视神经损伤不敏感导致治疗组与损伤组大鼠潜时,峰峰值无统计学意义,但是治疗组BDNFmRNA与损伤组有统计学意义,因此,超短波对大鼠视神经再生有促进作用。……