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N-V蛋白酶制剂检测及其质量分析

张建东

   本课题研究高效液相色谱法分离N-V蛋白酶的条件的选择,及对样品部分工艺的检测和对样品成分的分析,为该药的申报准备条件。 本试验选取两种不同类型的色谱柱即凝胶柱和离子交换柱分别对其进行研究,从影响色谱分析的因素出发,摸索最佳色谱条件。然后利用优化好的条件结合纤溶活性检测方法对部分工艺进行检测。最后结合各种电泳技术和免疫技术等对样品的成分进行深入研究。 实验结果如下: 凝胶色谱柱较合适的色谱分离条件:流速为1ml/min,柱温20℃,上样量为10μg,检测波长214nm和280nm,流动相为氯化钠和碳酸氢铵二者的水溶液浓度分别为0.1 mol/L、0.05mol/L。 离子交换色谱柱最终选定的较合适的流动相为醋酸钠-醋酸缓冲液,0~0.3mol/L Nacl线性梯度洗脱。 初步证实此酶可能是一组由多亚基组成的聚合蛋白。 对样品成分进行进一步的分析,取得较满意的结果。对样品质量标定的结果,纯度可达到95%以上。 选取低分子右旋糖酐为冻干时的赋形剂,并找出了合适的加入量。 综上,基本上完成了色谱法对该样品蛋白的分析鉴定,有利于对其进行深入的研究。……   
[关键词]:N-V蛋白酶;HPLC;电泳;质量标准;纤维蛋白
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林大学2008年