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淫羊藿苷对体外培养的鸡骨细胞的影响

胡云峰

   淫羊藿(Herba Epimdii)为小檗科植物,具有补肾壮阳,强筋骨,祛风湿的功效。众多临床治疗表明,含有淫羊藿的方药有助于骨折愈合和骨代谢疾病的治疗。本实验主要研究淫羊藿的主要成分淫羊藿苷对体外培养的鸡胚成骨细胞和破骨细胞的药理作用,诣在揭示淫羊藿苷对鸡骨代谢的影响,为淫羊藿应用于笼养蛋鸡骨质疏松症的防治提供理论依据。 1鸡胚骨髓源性破骨样细胞的诱导培养 建立简便有效的鸡胚骨髓破骨样细胞的诱导培养体系,获得高密度高纯度的破骨细胞,为研究淫羊藿苷及其他药物对鸡破骨细胞的作用和建立笼养蛋鸡骨质疏松症试验平台奠定基础。剔取18日龄鸡胚胫骨和肱骨,用注射器抽取α-MEM培养液冲洗骨髓腔,获取的细胞悬液接种于培养板。2 h后吸取未贴壁细胞,离心重悬,使细胞密度为2×10~6/mL,接种于培养板,加入诱导剂1,25-羟胆钙化醇,地塞米松,成功获得具有破骨细胞特征的细胞:细胞大,多核;TRAP染色阳性,在骨片表面形成吸收陷窝。’ 2淫羊藿苷对鸡胚成骨细胞增殖和分化的影响 体外培养鸡胚额骨成骨细胞,研究淫羊藿苷对成骨细胞增殖和分化的影响。加入不同浓度的淫羊藿苷,分别观察24 h、48 h、72 h等不同时间段对成骨细胞的影响,结果发现,淫羊藿苷能显著促进成骨细胞的分化,对增殖有微弱的促进作用,但不显著,并呈剂量依赖关系。其中,当淫羊藿苷浓度为20 ng/mL时,作用最为明显。 3淫羊藿苷对破骨样细胞形成和功能的影响 在成功建立破骨样细胞培养体系的基础上,根据试验二淫羊藿苷的作用浓度,研究淫羊藿苷对破骨样细胞形成和功能的影响。试验开始时,加入不同浓度的淫羊藿苷,观察淫羊藿苷对破骨样细胞形成的影响,结果发现淫羊藿苷显著抑制1,25-羟胆钙化醇,地塞米松诱导破骨样细胞形成的作用;在试验的第八天,即破骨细胞形成时,加入不同浓度的淫羊藿苷,观察淫羊藿苷对破骨样细胞骨吸收功能的影响,结果发现淫羊藿苷显著抑制破骨样细胞的骨吸收功能……   
[关键词]:破骨样细胞;1;25-羟胆钙化醇;地塞米松;淫羊藿苷;成骨细胞
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京农业大学2007年