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大豆皂苷的提取分离及其溶血、止咳祛痰研究

王俊伟

   大豆皂苷是大豆中的有效活性成份之一,是近年来食品与营养品研究的热点之一,是一类从豆科植物大豆中分离提取的由齐墩果烷型三萜苷元与低聚糖连接而成的三萜皂苷,具有免疫调节、抗癌防癌、降血脂、降胆固醇、抗氧化等生理活性,可广泛应用于药品、保健食品和化妆品等领域。 本文以研究大豆皂苷的止咳、祛痰生物活性为目的,研究了大豆皂苷的提取、分离及检测方法。试验采用大豆豆渣为原料,对乙醇浓度、浸提时间和液料比等主要影响因素进行了单因素试验,在单因素试验的基础上进行了正交实验,得到最佳提取组合条件为乙醇浓度70%,提取时间12h,固液比1:5。并通过皂苷类物质的显色反应和薄层层析对提取物进行定性分析;然后采用大豆皂苷的苷元类似物齐墩果酸作为标准品,通过香草醛-高氯酸比色法对大豆皂苷进行定量检测。通过本方法制得了含量为19.3%的大豆皂苷样品。利用分光光度法测定大豆皂苷,方法简便,重现性好,可作为检测大豆皂苷粗提物中皂苷含量的手段。 大豆皂苷的分离纯化,采用D101大孔吸附树脂柱层析。通过对洗脱溶液、洗脱溶液用量、洗脱速度的考察,确定了最佳洗脱条件为100ml70%乙醇溶液洗脱,洗脱速度为0.4ml/min,通过香草醛-高氯酸比色法检测大豆皂苷含量为61.2%,回收率为78.1%。 对于上述提取、分离纯化的大豆皂苷,我们进行了生物学活性的实验研究。通过观察大豆皂苷对兔血红细胞的作用,确认大豆皂苷具有溶血性,有溶血作用的最低浓度为0.6mg/ml;另外通过给小鼠灌喂生理盐水、氢溴酸右美沙芬口服液和大豆皂苷生理盐水溶液,采用氨气引咳,观察小鼠的咳嗽潜伏期、3分钟内咳嗽次数和气道酚红排泌情况,研究了大豆皂苷止咳、祛痰的药理效果。结果表明当灌喂的大豆皂苷和氢溴右美沙芬含量相同时,大豆皂苷止咳、祛痰效果均优于氢溴酸右美沙芬口服液,两者合用效果也较为明显。同时动物实验表明,大豆皂苷在低浓度的情况下未显示溶血方面的毒性。 本研究为大豆皂苷作为产品开发利用提供了坚实的理论基础,具有很强的实践指导意义。……   
[关键词]:大豆皂苷;提取;纯化;溶血;止咳;祛痰
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:合肥工业大学2007年