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养阴抗毒胶囊2号对阴虚大鼠模型糖皮质激素受体mRNA和蛋白表达的影响

丁鑫

   实验目的: 建立外源性糖皮质激素致阴虚证大鼠模型,探讨养阴抗毒胶囊2号(YC2)对模型大鼠血清皮质醇(CORT)水平、肝组织细胞核内糖皮质激素受体(GR)蛋白和mRNA水平的影响,探讨养阴抗毒胶囊减轻激素副作用的机理。 实验方法: SD大鼠40只,随机分为空白对照组、阴虚模型组(YD)、养阴抗毒胶囊2号组(YC2)、六味地黄丸组(LD)、桂附地黄丸组(GD)。在不同药物干预后9天后处死,用放射免疫方法检测各组血清皮质醇(CORT)含量;免疫组织化学染色技术测定肝组织细胞核内GR表达情况;RT-PCR测定肝组织糖皮质激素受体mRNA水平。 实验结果: 阴虚组大鼠与空白对照组相比,血清CORT含量明显升高,说明模型建立成功(P<0.05);养阴组、六味组大鼠血清CORT含量均不同程度低于阴虚组(P<0.05),提示两者对外源性GC所致的阴虚大鼠模型血清CORT含量增高有一定的抑制作用。桂附组与阴虚组相比,CORT含量没有差别(P>0.05),提示GD对外源性GC所致的阴虚大鼠模型血清CORT含量增高没有抑制作用。 免疫组化染色结果显示,正常情况下GR在肝脏组织细胞核内广泛表达,免疫组化阳性反应较强。阴虚组大鼠与正常组比较肝组织核内GR蛋白表达减少(P<0.05);而养阴组大鼠比阴虚组肝组织核内GR蛋白表达增多(P <0.05),但仍较正常组略低(P<0.05);六味组大鼠肝组织核内GR蛋白表达较阴虚组增多(P<0.05),但与养阴组没有区别(P>0.05);桂附组大鼠肝组织核内GR蛋白表达较正常组减少(P<0.05),但较阴虚组略高,但没有统计学差异(P>0.05)。 将电泳后的凝胶置于Gel Doc 2000凝胶图像分析系统分析,以PCR目的产物的光密度与GPDAH产物的光密度比值为最终结果。采用SPSS 13.0统计软件对光密度比值做单因素方差分析,结果如下:①空白组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.904±0.045,阴虚模型组的比值为0.621±0.027,为空白组GR mRNA水平的比值的68.7%,GR mRNA水平降低(P<0.01),有统计学意义。②养阴组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.796±0.022,为空白组GR mRNA水平的比值的88.1%,比阴虚模型组提高了19.4%(P<0.01),有统计学意义,提示养阴抗毒胶囊能够提高阴虚大鼠肝组织GR mRNA水平。③六味组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.724±0.014,为空白组水平的80.1%,与阴虚模型组相比,提高了11.4%(P<0.01),有统计学意义;与养阴组相比,比值下降8.0%(P<0.01),有统计学意义。提示养阴药物能够提高阴虚大鼠肝组织GR mRNA水平,而且养阴抗毒胶囊比六味地黄丸更有效。④桂附组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.685±0.033,为空白组的比值的75.8%,与阴虚模型组相比,有统计学意义(P<0.01),提示助阳药对阴虚大鼠肝组织GR mRNA也有影响,但远不如养阴药如养阴抗毒胶囊、六味地黄丸的影响大。 结论:本实验中阴虚大鼠模型血清CORT含量明显升高,肝组织细胞核内GR表达明显减少,GR mRNA水平降低。而养阴抗毒胶囊2号能明显降低阴虚大鼠模型CORT水平,提高阴虚大鼠肝组织细胞核内GR表达和GR mRNA的水平,提示这可能是其预防和治疗糖皮质激素不良反应的机理之一。……   
[关键词]:养阴抗毒胶囊2号;阴虚;大鼠;糖皮质激素受体;mRNA;皮质醇
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:第四军医大学2007年