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生物体内乙醇脱氢酶(ADH)的活力测定、分布及其与乙醇代谢动力学的关系

宋宇

   乙醇(alcohol)俗称酒精,是各种酒类饮料的主要成分,是世界范围内被普遍滥用的一种物质。由此造成了许多暴力死亡和交通事故的发生。在这些情况下都需对血液中的乙醇浓度(blood alcohol concentration,BAC)进行测定,而BAC的检测结果是正确处理与乙醇有关的事(案)件的主要依据。饮酒后BAC与乙醇代谢动力学密切相关,而乙醇代谢动力学参数又与乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)的活力密切相关。 本研究采用了顶空-气相色谱(head space gas chromtography,HS-GC)条件测定ADH活力。对ADH的最适反应条件、反应终止液的浓度和用量、乙醇的相关物质进行了考察。实验结果表明ADH的最适反应条件为,最适pH值9.0,反应物乙醇的最适浓度为20.0mmol/L,反应物NAD的最适浓度为10.0mmol/L;最佳反应终止液为十二烷基磺酸钠。 应用前文的HS-GC法,以健康Wistar大鼠为实验动物,对不同实验组大鼠的乙醇代谢动力学进行了研究。结果表明,随着反复饮酒时间的延长,同空白组大鼠的药动学参数进行比较,实验组大鼠的(1)总消除速率常数、滞后时间、尿药排泄速率常数、清除率、吸收速率常数升高;(2)达峰时间、达峰浓度、药时曲线下面积降低。(3)最适房室数与权重变化不明显。 为了考察ADH在大鼠不同组织中的分布与活力变化规律,应用前文HS-GC测定方法,对各实验组大鼠的血清、肝脏,胃黏膜,及小肠组织中ADH活力进行了测定;并进行了统计学比较。实验结果表明,(1)随着饮酒时间的延长,大鼠小肠组织中ADH活力变化不明显;胃黏膜组织ADH的活力下降;肝脏组织中ADH活力上升;血清中ADH活力虽然也上升,但在初期变化不明显;(2)经统计学分析,每组的不同组织之间的ADH活力,无论总体、还是两两之间进行的比较,结果均有显著的统计学差异(P<0.05);胃黏膜、血清、肝脏三种组织在不同组之间进行总体比较时,有统计学显著差异(P<0.05);而小肠组织无统计学差异(P>0.05)。 为了考察ADH与代谢动力学参数之间的关系,应用前文的HS-GC测定方法,测定了不经常饮酒与经常饮酒志愿者血清中ADH的活力,并整理本课题组已研究的代谢动力学资料,结果表明,志愿者血清中ADH活力和动力学参数的变化规律同实验组大鼠相似;找出其中变化规律相似的大鼠药动学参数,并将其与大鼠血清ADH活力值进行相关统计分析,结果表明,大鼠血清ADH活力值同总消除速率常数K、达峰浓度C_(max)、药时曲线下面积AUC呈显著相关关系;同尿药排泄速率常数K_a相关关系不密切。在一定条件下,血清ADH的活力大小对代谢动力学参数有明显影响。 本课题利用顶空-气相色谱条件和酶活力测定终止法,测定了不同实验组大鼠的乙醇代谢动力学参数和其不同组织中的ADH的活力、以及这两者的变化规律、初步探讨了大鼠血清中ADH活力与代谢动力学参数之间的相关关系。为法医学实践中对乙醇代谢时的效性判断提供了重要参考。……   
[关键词]:乙醇;代谢动力学;顶空气相色谱法(HS-GC);ADH;相互关系
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:四川大学2007年