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中国新疆地区传统发酵酸马奶的化学组成及乳酸菌生物多样性研究

孙天松

   本课题对新疆不同地区传统发酵酸马奶的化学及微生物组成进行了分析,同时对酸马奶中的乳酸茵的生物多样性及DNA多态性进行了研究。为全面系统地了解新疆地区酸马奶的组成特点提供了基础数据,也为进一步开发和利用传统发酵乳制品中的乳酸菌资源奠定了基础,同时初步建立了一套在分子水平上对乳杆菌进行分类的AFLP试验体系。 对新疆地区28份传统发酵酸马奶的化学及微生物组成研究结果表明:酸马奶样品中脂肪、蛋白质、乳糖、灰分、钙和磷的平均含量分别为(1.87±0.33)g/100mL、(2.07±0.29)g/100mL、(2.6±0.63)g/100mL、(0.28±0.05)g/100mL、(72.25±13.46)mg/100mL、(52.23±11.35)mg/100mL。28份酸马奶的pH值平均为3.8±0.27,酸度平均为(106.57±43.21)°T,乳酸含量平均为(9.10±3.56)g/L,乙酸含量平均为(1.18±0.50)g/L,柠檬酸含量平均为(0.06±0.06)g/L,乙醇含量平均为(14.52±3.79)g/L。大多数酸马奶样品中的乳酸菌数在1.07×10~7cfu/mL~9.70x10~7cfu/mL之间,酵母菌数在10~5cfu/mL~10~6cfu/mL之间,总体而言,酸马奶中乳酸菌数要较酵母菌数高1~2个对数级。 从28份酸马奶样品中共分离到152株乳杆菌,采用传统分类鉴定方法对其进行鉴定,结果表明该地区酸马奶中的乳杆菌主要有Lactobacillus(L.)helveticus(占总分离株的51.3%),L.acidophilus(18.4%)和L.casei subsp.pseudoplantarum(8.6%)。此外,L.gasseri、L.casei subsp.casei、L.sanfrancisco、L.coryniformis subsp.coryniformis、L.curvatus、L.brevis、L.plantrum、L.homohiochii、L.fermentum、L.dellbrueckii subsp.bulgaricus、L.ruminis、L.crispatus、L.farciminis及L.hilgardii等乳杆菌在酸马奶中也有出现,但其数量较少(1~4株),还有8株乳杆菌按目前的鉴定方法无法准确判断其归属。新疆不同地区酸马奶中的乳杆菌的种类和数量有所不同,呈现出多样性,但L.helveticus和L.acidophilus存在于所有的酸马奶样品中,L.helveticus为新疆地区酸马奶中的优势乳杆菌。耐酸性研究结果表明,大多数乳杆菌分离株(69.1%)可以在pH3.5的培养基上生长。 利用16S~23S rDNA短间隔区(Short ISR)序列分析的方法,对8株未能鉴定到种的乳杆菌进行了鉴定。结果表明,XF5-2为L.casei subsp.casei,B10-2和XB2-3为L.helveticus,E91和E112为L.kefir,C56、D73和E96暂定为L.ferintoshensis。16S~23S rDNA短间隔区序列分析可以识别L.rhamnosus和L.casei,而对于L.ferintoshensis、L.kefir、L.buchneri和L.hilgardii的区分效果不明显,但是仍有助于将未知乳杆菌归入这一群。 采用AFLP标记对分离自新疆地区酸马奶中的部分乳杆菌DNA多态性研究结果表明,在73%的相似性水平上67株乳杆菌被分为18个AFLP群,表现出较高的DNA多态性,并且可以将L.casei、L.acidophilus和L.helveticus区分开,对L.helveticus的聚类结果与传统分类鉴定结果基本一致。DNA多态性显示L.sanfrancisco、L.curvatus、L.coryniformis subsp.coryniformis、L.brevis、L.fermentum、L.ruminis、L.crispatus及L.hilgardii之间具有较高的相似性,并且在73%的相似性水平上与8株L.casei聚为一群。种内分型结果表明,在73%的相似性水平上可以将L.acidophilus、L.casei和L.helveticus分别分为12个、8个和9个AFLP基因型,菌株的AFLP基因型与其来源之间没有必然的联系,存在有交叉。……   
[关键词]:酸马奶;化学组成;微生物组成;乳酸菌;乳杆菌;生物多样性;16S~23S rDNA短间隔区;扩增片段长度多态性
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:内蒙古农业大学2006年