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棉花原生质体培养与融合

王令刚

   棉花是重要的经济作物,棉花种质资源的创新是棉花遗传育种的基础。丰富的棉花野生种是一个宝贵的遗传资源库,对棉花的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用价值。要开展亚洲棉原生质体培养和融合,首先要建立一套适合亚洲棉棉种体细胞胚胎发生和植株再生的实验体系,必须建立和优化亚洲棉的原生质体培养体系。 本研究重点分析了亚洲棉体细胞培养和原生质体培养与融合各影响因素。本研究发现,体细胞培养中a-Naphthalene acetic acid 0.5 mg/L+Kinetin 0.1 mg/L激素组合是前期最适宜的诱导培养基,但没有得到亚洲棉的胚性愈伤。试验比较了影响亚洲棉原生质体分离的若干影响因素,预处理12-24 h、11%的甘露醇调节渗透压、酶液组成和浓度(纤维素酶1.5%、离析酶1%、半纤维素酶2%)、质壁分离的时间为3 h、酶解时间为14 h可以得到最高的原生质体产量和最好的质量。研究结果对建立高效的亚洲棉原生质体再生系统及其遗传操作有参考价值。对亚洲棉和戴维逊氏棉原生质体融合的研究结果表明,在交流场强100 V/cm、直流脉冲电场为1.25 kV/cm、脉冲幅宽为50μs、脉冲间隔为0.5 sec以及脉冲次数为3次的实验条件下,原生质体具有最高的融合频率和细胞活力。……   
[关键词]:亚洲棉;体细胞胚胎发生;原生质体培养;原生质体融合
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2007年