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柑橘抗寒相关基因的鉴定与表达分析

焦徕

   柑橘原产我国,是世界上十分重要的水果,产量居各种水果之首,是我国长江流域及以南各省的主栽果树,已成为南方农村经济的支柱产业之一。冻害是世界性的柑橘生产上的主要灾害之一。历史上,我国长江流域、美国佛罗里达州和加里佛利亚州等柑橘产区就因严重的周期性冻害数次遭受严重打击。抗寒育种已成为世界各柑橘生产国柑橘育种的主要内容之一。人们通过各种传统的育种手段去改善柑橘作物的抗寒性,然而,由于对柑橘抗寒的机制知之甚少,到目前为止进展甚微。 本研究采用抑制性消减杂交(PCR-Select cDNA subtraction)技术,以枳壳为材料,研究柑橘抗寒相关基因的表达,将筛选到的差异表达cDNA克隆构建差减文库并加以鉴定,获得了一个首次在柑橘上发现的、特有的、编码冷相关COR413蛋白的基因的EST序列,以及多个功能未知的相关基因,并在研究过程中对SSH试剂盒在柑橘上应用的检测手段进行了改进与完善,为拓展其在柑橘上的应用铺平了道路。对不同抗寒性柑橘进行生长期低温处理的试验,摸索出了生长期低温处理的适宜条件,并以此为据,对PM型Ca~(2+)-ATPase基因和柑橘低温诱导蛋白编码基因及柑橘几丁质酶基因进行了初步表达分析。为实施柑橘抗寒基因工程培育抗寒品种奠定基础,为探明柑橘抗寒的分子机理提供理论依据。……   
[关键词]:宫本;积壳;抑制性差减杂交;差异表达;表达分析
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:湖南农业大学2007年