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人工诱导黄颡鱼雄核发育的研究

徐辉

   黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)属鲇形目、鲿科、黄颡鱼属,俗称嘎牙子,在我国各大水系均有分布。其肉质细嫩鲜美、营养丰富,是近年来新开发的一种重要的养殖品种,市场价值较高。黄颡鱼的雌、雄个体间有明显的生长差异,雄性个体的生长指标在1、2龄时分别是雌性个体的1.7倍和1.2倍,并且伴随性腺的发育,雌性个体出现生长衰退较早,而雄性的生长衰退则出现的较晚。因此,利用雄核发育技术对黄颡鱼进行工程技术育种,获得YY超级雄鱼,进而生产全雄群体,具有极其重要的经济意义和研究价值。目前,尚无人工诱导黄颡鱼雄核发育的报道。 本研究以黄颡鱼为研究对象,通过紫外线处理卵子,研究黄颡鱼卵子的遗传失活,寻找到适宜的失活条件;热休克处理抑制第一次卵裂诱导卵子加倍的方法进行了人工诱导雄核发育的研究,探寻适宜的诱导条件。试验结果如下: 通过人工催情技术进行黄颡鱼的产孵,采集发育良好的未受精卵子置于人工合成卵巢液或TC-199溶液中,经辐射强度为2 mw/cm~2的紫外线照射,共分10个处理组,处理组的紫外线照射时间从40s至130s,辐射剂量分别达到80~260 mJ/cm~2,然后取黄颡鱼精子正常授精,水温控制在26±1℃,孵化诱导精子发育为单倍体胚胎。各处理组均出现畸形苗,并且伴随辐射剂量的增大,畸形率呈上升趋势,而受精率和出苗率均呈下降趋势。当辐射剂量达到220 mJ/cm~2时,畸形率达到100%,雌核被完全遗传失活,由此确认该剂量是适宜的诱导条件。所有畸形仔鱼均具有典型的单倍体综合症的特征,通过流式细胞仪对其倍性进行分析,发现其为单倍体,由此证明,通过本试验所采用的方法和计量处理,卵子的遗传物质已经失去活性。 在相同辐射剂量条件下,两种卵子保护液的效果均较为理想,但人工合成卵巢液(OF)作为卵子保护液时,诱导单倍体畸形苗的比例要高于以TC-199溶液作为保护液的比例。这说明人工合成卵巢液对卵子的保护作用更好。 将未受精卵置于人工合成卵巢液中,在220 mJ/cm~2的紫外线辐射剂量下进行遗传失活处理,然后立即人工授精并正常孵化。在受精后15 min开始至胚胎发育到37 min,间隔2 min将鱼卵置于40℃的温水中进行热休克处理,分别处理2 min和3 min。试验结果表明:处理后的胚胎有一定比例的正常仔鱼出现,说明获得了雄核发育的二倍体。处理时间2 min组的试验效果较好,分别在受精后17~21 min和27~31 min出现两个二倍体的诱导高峰,出苗率最高出现在受精后29 min,为3.30%,但两个峰值之间的差异不明显。……   
[关键词]:黄颡鱼;雄核发育;紫外线照射;热休克
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:东北农业大学2007年