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罗格列酮对哮喘患者T淋巴细胞源性IL-10的影响及调节NF-κB的可能机制

凌婵

   目的 1、观察支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血T淋巴细胞分泌白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的状态。 2、观察罗格列酮对哮喘患者T淋巴细胞NF-kB活性的影响及可能机制。 方法 选取哮喘患者和健康自愿对照者各10名,抽取外周静脉血10ml用淋巴细胞分离液分离外周血PBMC(peripheral blood mononuclearcells,PBMC),制成PBMC细胞悬液,悬液贴壁培养2小时分离纯化T淋巴细胞并按如下分组:A1组(健康对照者T淋巴细胞原液组,即于含10%胎牛血清、100U/ml青霉素和100U/ml链霉素、万分之三谷氨酰胺及50μg/ml PHA的RPMI-1640培养基(完全培养基)中培养;A2组(哮喘患者T淋巴细胞原液组);A3组(哮喘患者T淋巴细胞,在A2组基础上加终浓度为20μmol/1的罗格列酮)。A4组(哮喘患者T淋巴细胞,在A2组基础上加终浓度为20μmol/1的罗格列酮及终浓度为10μg/ml的IL-10抗体),细胞浓度均为1×10~6/ml。将上述分组细胞置于饱和湿度、37℃、含5%CO2培养箱中培养培养48小时,每次培养的同时都用其完全培养基做无细胞的空白对照组。然后用ELISA法测定培养上清液IL-10浓度,收集细胞并用细胞免疫化学染色检测T淋巴细胞内核因子-kB(nuclear factor-kappaB,NF-kB)活化情况。 统计学方法 用SPSS13.0统计软件进行统计分析,测定值采用均数±标准差((?)±S)表示。在方差齐性基础上完全随机设计的多个样本均数比较采用F检验,完全随机设计的多个样本均数之间的两两比较采用最小显著差异t检验,并将哮喘T淋巴细胞之NF-kB活性与上清液IL-10浓度行直线相关分析,α=0.05,双侧P≤0.05有统计学意义。 结果 培养上清液IL-10浓度:A2组上清液IL-10浓度明显低于A1组(P<0.05);A3组上清液IL-10浓度明显高于A2组(P<0.05),A1和A3组比较无差别(P>0.05);A4组上清液IL-10浓度均低于A1,A2,A3组,即A1,A3>A2>A4。 T淋巴细胞NF-kB活化率:A2组T淋巴细胞NF-kB活化率明显高于A1组(P<0.05);A3组T淋巴细胞NF-kB活化率明显低于A2组(P<0.05);A2和A4组比较无差别(P>0.05),即A2,A4>A3>A1。 NF-kB活化率与培养上清液IL-10浓度的相关性:A2组T淋巴细胞NF-kB活性与A2组上清液IL-10浓度成负相关(r=—0.81,P<0.01);A3组T淋巴细胞NF-kB活性与A3组上清液IL-10浓度成负相关(r=—0.84,P<0.01);A4组T淋巴细胞NF-kB活性与A4组上清液IL-10浓度成负相关(r=—0.82,P<0.01)。 结论 1、哮喘患者外周血T淋巴细胞分泌白细胞介素-10水平减低。 2、哮喘患者T淋巴细胞NF-kB活性明显增高,可能与IL-10分泌减低有关。 3、罗格列酮明显升高哮喘患者T淋巴细胞源性IL-10水平。 4、罗格列酮可抑制T淋巴细胞NF-kB活性,其机制可能与升高IL-10水平有关。 5、抗IL-10抗体能抑制T淋巴细胞源性IL-10的升高,可能与阻断IL-10分泌有关。……   
[关键词]:哮喘;白细胞介素-10抗体;罗格列酮;白细胞介素-10;核因子-κB
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中南大学2007年