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欧李组织培养体系试验研究

张秀丽

   本试验研究目的在于探索欧李(Prunus humilis(Bge).Sok)离体快繁的有效途径,采用其带腋芽的茎段来诱导愈伤组织,通过愈伤组织分化来增殖;同时以茎尖为外植体直接诱导不定芽,继而进行增殖培养。试验以单因素和复因素设计为主,对结果作方差分析及多重比较,确定了欧李组织培养的一系列技术参数组合,为其工厂化生产提供了一定的理论基础和技术支持,研究结果表明: 1.欧李离体培养适宜的外植体为新枝的中部带腋芽的茎段,其污染率低、分化出芽较快。 2.欧李采样的最佳时期为4月中旬,其萌芽率高,污染率低,无菌苗生长快:同时不同消毒时间对欧李初代培养有一定的影响,消毒时间8分钟的处理无论在污染率、死亡率、萌芽率上都好于其它两个处理,萌芽率可以达到93.3%。 3.欧李诱导愈伤的适宜激素组合为NAA和BA,培养基组成:1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.8 mg/L,其愈伤块绿色,组织致密,量多。 4.诱导欧李茎尖分化的适宜培养基为MS+BA0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其茎粗,分化好,叶片生长正常,植株较健壮,大部分植株一次性成苗。 5.MS培养基是继代增殖培养的最适培养基。 6.欧李增殖生长阶段适宜的生长素和细胞分裂素为NAA和BA,两者的浓度配比为NAA0.06 mg/L+BA1.0 mg/L。此外,针对欧李组培苗生长缓慢,为了保持一定的增殖系数,继代周期以45 d为宜。 7.欧李对pH的适应范围很广,在pH5.8~6.2的环境中都能生长,但在pH5.8时,增殖系数和平均茎伸长量都达到最大值。 8.欧李组织培养增殖生长需要NH_4~+和NO_3~-的配合使用。在MS培养基基础上,维持较高浓度的NO_3~-能促进欧李组织培养的增殖生长,且NH_4~+/NO_3~-比例为1/2时增殖效果最好。 9.优级白砂糖作为碳源对欧李增殖生长的效果与分析纯蔗糖相比没有明显差异,从而可以大大降低组培成本。 10.针对欧李试管苗生根慢,接种的无菌苗高度一般在2 cm左右,带2片叶片,长势好的材料生根效果好些;生长素IBA比较适合诱导欧李试管苗生根,同时,1/2MS+IBA0.05 mg/L的处理,根的长度适中,侧根多,根的粗度适中并且有较高的生根率,比较适合生根培养。 11.欧李炼苗天数以7~10 d为宜,初期移栽基质的选择,以通透性强的基质为适合基质,全蛭石的基质为最适合的移栽基质。……   
[关键词]:欧李;组织培养;不定芽;增殖培养;生根培养
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河北农业大学2007年
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