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用悬浮芯片技术定量检测多种病原体的研究

王静

   目的:利用悬浮芯片技术,探讨直接从“白色粉末”样品中同时检测5种病原体(细菌、细菌芽孢、病毒、细菌毒素、植物毒素)的可行性,为建立快速、敏感、特异、高通量、同时检测多种生物恐怖因子的技术平台奠定基础。 方法:用抗体包被编码微球作为反应载体,双抗体夹心法为反应模式,建立5种代表性的病原体悬浮芯片检测方法,对“白色粉末”中的鼠疫耶尔森菌、炭疽芽孢、葡萄球菌肠毒素B、蓖麻毒素、SARS冠状病毒同时进行检测。通过盲样和标准实验室检测评估对现场样品的适用性。 结果:建立的悬浮芯片多病原体检测系统具有较高的特异性和敏感性,检测鼠疫耶尔森菌、炭疽芽孢、葡萄球菌肠毒素B、蓖麻毒素、SARS冠状病毒N蛋白的灵敏度分别为67.5 cfu/mL、10~3 cfu/mL、0.203 ng/mL、29.1 ng/mL、4.86 ng/mL,并分别在10~2~10~8 cfu/mL、10~3~10~7 cfu/mL、0.02-152.7 ng/mL、3.56-100852.1ng/mL、0.391-25600 ng/mL浓度范围内具有良好的动力学响应特性,比ELISA方法有较高的灵敏度和较宽动态检测范围。 结论:多病原体悬浮芯片检测系统能快速、敏感、特异、同时地定量检测“白色粉末”中的五种病原体,在早期识别、快速诊断和应对生物恐怖威胁、传染病暴发中具有广阔的应用前景。……   
[关键词]:悬浮芯片;检测;双抗体夹心法;生物威胁剂
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:中国人民解放军军事医学科学院2007年