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斑鳢组织细胞学研究与UCP2基因克隆

崔郁敏

  斑鳢是我国珍贵的经济淡水鱼类,为进一步了解该名优养殖品种的正常生理,积累组织细胞学基础资料,并为其疾病的防治提供参数,本研究以斑鳢外周血、肝脏、脾脏作为材料进行组织细胞学研究,然后以肝脏RNA为模板,克隆肥胖候选基因—解偶联蛋白2(UCP2)基因,并进行序列分析。以活体心脏取血的方法采集外周血,以肝素作为抗凝剂,按照常规方法制成血涂片置于光学显微镜下进行观察及摄影,发现斑鳢外周血中红细胞数量占优,细胞密度大,成熟红细胞呈椭圆形,核近圆形位于细胞中央,核内含有致密的染色质团块,胞质内充满血红蛋白;偶见幼稚型红细胞,多呈圆形或不规则圆形,易于被挤压变形,其核较大,染色质结构疏松,胞质内血红蛋白含量较少。而白细胞中可见血栓细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,未发现和嗜碱性粒细胞,各类白细胞的形态特征与国内外已报道的硬骨鱼类外周血细胞显微结构研究结果基本一致,其中血栓细胞常成群聚集,亦能发现单个存在的细胞,易与其它各类细胞区分,细胞体积小呈卵圆形,细胞质仅一薄层绕核零星分布,边界模糊,或裸核状,染色质致密;淋巴细胞一般为小到中等大小,可根据细胞的大小及内部结构特征,可将其分为小淋巴细胞和大淋巴细胞两种,小淋巴细胞个体小,核近圆形,染色质致密且占细胞大部分,胞质极薄仅于核外侧有一薄层,有的边缘平整,有的呈星形突起,其中可见少数嗜天青颗粒,大淋巴细胞与小淋巴细胞相比,体积大,胞浆量稍多,核呈圆形,所占比例大,中位,染色质呈粗网状,核质之间可看到核环带。单核细胞呈卵圆形,边缘有伪足状突起,核基本呈卵圆形,核质之间无环核带,染色质疏松网状,胞质丰富其内有空泡,有时散布若干细小颗粒。嗜中性粒细胞呈圆形,胞核为肾状,偏于细胞一侧,染色质浓密紫红色,胞质灰蓝色,有些细胞胞质内有颗粒,细胞边缘较平整。将鱼体的肝脏和脾脏按照常规组织切片技术制片后置于光学显微镜下观察其组织结构,发现斑鳢肝脏由相互交错的肝细胞索所组成,细胞索之间有大量的毛细血管,腺管非平行排列而是密集形成网状,结缔组织纤维将肝脏分成许多称为肝小叶的区域,这些结缔组织在斑鳢肝小叶间分布比较稀少,所以肝小叶间分界不明显;肝小叶是肝脏的基本组织结构,肝脏内含有无数肝小叶,肝小叶中心有一血管,是肝静脉的分支,称为中央静脉;肝细胞以中央静脉为中心向四周呈放射状排列,称为肝细胞索,细胞索分支连接成网状结构,网眼间隙含有窦周隙,肝细胞索之间有肝血窦,窦壁细胞分……   
[关键词]:组织学;基因克隆;外周血细胞;肝脏;脾脏;UCP2;斑鳢
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:暨南大学2006年