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“海湾红宝石”李茎段离体培养研究

邹英宁

   李(Prunus salicina)为我国重要的多年生落叶果树,果实色、香、味俱佳,栽培历史悠久。但李具有童期较长、雌蕊败育率高、遗传高度杂合及易受病毒病危害等特性。李离体培养及再生技术体系的建立,不仅是苗木快速繁殖和无病毒苗木培育的新途径,而且也是开展李生物技术研究如种质资源离体保存、提高育种效率及遗传转化和创新种质资源等技术的基础。 本研究以“海湾红宝石”李(Prunus salicina Lindl.cv.Gulf-ruby)茎段为外植体进行离体再生体系的建立,着重研究了“海湾红宝石”李茎段培养的最佳取材时期、消毒方法、培养基配方和培养程序,以及影响快速繁殖的关键性因素,初步建立了一套较为系统完整的快速繁殖技术体系。主要研究结果如下: 1.通过周年外植体消毒试验,结果表明4~5月为最佳取材时期,此时外植体正处于春季萌发生长阶段,带菌较少,成活率高,易诱导成苗。此时期外植体采用70%酒精30s+(0.5%NaClO+吐温-20 2~3滴)12min消毒效果较好。 2.若要进行周年生产,应针对不同的外植体取材时期采用不同的消毒方法:生长前期(4~5月)外植体采用70%酒精30s+(0.5%NaClO+吐温-20 2~3滴)12min消毒效果较好;生长后期(6~11月)外植体采用70%酒精30s+(1%NaClO+吐温-20 2~3滴)15min消毒效果较好;休眠期(12~3月)外植体采用70%酒精30s+(5%NaClO+吐温-20 2~3滴)15min消毒效果较好。 3.经过筛选,初代培养适宜的培养基配方为:WPM+IBA 0.05~0.1mg/L+BA0.5~1.0mg/L+葡萄糖30g/L+琼脂5g/L+Vc 1.0g/L。黑暗或弱光条件下(外植体用报纸覆盖)培养5d后转移到白光下培养,能达到较为满意的效果。 4.继代培养中以增殖为目的时,适宜的培养基配方为WPM+IBA 0.05~0.1mg/L+BA0.2mg/L+KT0.3mg/L+葡萄糖30g/L+琼脂5g/L+Vc 1.0g/L+CH 1.0g/L。末次继代(生根前)时,为加快嫩茎伸长生长为诱导生根做准备,同时考虑到节约成本,适宜的壮苗培养基配方为WPM+IBA 0.05~0.1mg/L+BA 0.3mg/L+葡萄糖30g/L+琼脂5g/L+Vc 1.0g/L+CH 1.0g/L。 5.生根培养中,适宜的培养基配方为:1/2MS+IBA 0.2~0.5mg/L+蔗糖15g/L+PG 20~40mg/L。暗培养放置7d后转移到白光下培养,能达到较为满意的效果。 6.炼苗移栽试验中,将生根苗从恒温培养室移出,封口膜半开置于自然光下炼苗2d后,去封口膜,在培养基中加入少量蒸馏水后继续在自然光下炼苗3d,再将生根苗取出用温水洗净,移入基质中。移栽基质:菜园土:珍珠岩:蛭石=1:1:1 (v:v:v)。……   
[关键词]:“海湾红宝石”李;茎段;离体培养
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2006年
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