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川芎嗪对人视网膜色素上皮细胞表达低氧诱导因子-1α及VEGF的影响

陈忠平

  目的:1、探讨川芎嗪对离体培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE细胞)增殖的影响。2、探讨糖基化终产物(AGEs)作用下人RPE细胞中核转录因子低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达的改变及相关细胞因子血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达的改变。3、探讨加入川芎嗪后对AGEs作用下人RPE细胞中HIF-1α蛋白表达、VEGF mRNA及蛋白表达改变的影响,探讨川芎嗪治疗糖尿病视网膜病变(DR)的分子机制,为川芎嗪治疗DR提供实验依据。方法:1、应用酶消化法分离人RPE细胞,进行形态学观察,并运用免疫细胞化学法做抗人角蛋白抗体鉴定,取3-8代细胞用于实验。2、细胞计数法、四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度(0、10、20、40、80、160、320、640mg/L)和处理时间(24和48h)下川芎嗪对RPE细胞增殖活性的影响,并计算出相应的细胞增殖抑制率。3、免疫细胞化学方法及免疫印迹法(Western Blot)观察相同时间不同浓度AGEs作用下、相同AGEs浓度不同作用时间组RPE细胞中HIF-1α蛋白表达的改变。4、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)观察相同时间不同AGEs浓度作用组、相同AGEs浓度不同作用时间组RPE细胞中VEGF mRNA表达的改变。5、免疫细胞化学方法及免疫印迹法(Western Blot)观察相同时间不同AGEs浓度作用组、相同AGEs浓度不同作用时间组RPE细胞中VEGF蛋白表达的改变。6、观察加……   
[关键词]:川芎嗪;糖基化终产物;视网膜色素上皮细胞;低氧诱导因子-1α;血管内皮生长因子
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:中南大学2006年