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应用基于上转换发光技术的免疫层析法检测鼠疫耶尔森氏菌

闫中强

  目的:利用基于上转换发光技术(Up-Converting Phosphor Technology,UPT)生物传感器与免疫层析分析方法(immunochromatographic assay,ICA)相结合的技术平台,研制开发基于上转换发光材料(Up-Converting Phosphor,UCP)为标记物的免疫层析试纸条,实现对鼠疫耶尔森氏菌高灵敏度快速地现场检测,同时为UPT-ICA在多种生物分析中的广泛应用奠定基础。方法:采用400-nm大小的UCP颗粒作为标记物,双抗体夹心法作为反应模式来制备免疫层析试纸条;通过UPT生物传感器对免疫层析试纸条上经免疫反应而结合的UCP发光信号进行扫描检测,在一定范围内搜索检测带信号(V_T)和质控带信号(V_C),并计算得出检测带与质控带的信号比值(V_T/V_C),利用此信号比值可以对标本中的鼠疫耶尔森氏菌F1抗原、全菌进行定性和定量检测。结果:检测鼠疫耶尔森氏菌的UPT-ICA试纸条具有较高的特异性,检测灵敏度为10,000CFU/ml,并在10~4~10~8CFU/ml浓度范围内具有良好的线性响应特性,且与平板活菌计数法有较好的一致性(r=0.92406,p<0.001),批内和批间误差(CV)<15%。检测F1抗原的灵敏度为1ng/ml,其线性检测范围为1-300ng/ml。结论:UPT-ICA系统能快速特异地定性、定量检测鼠疫耶尔森氏菌F1抗原和全菌,在鼠疫的现场监测过程中具有广阔的应用前景。……   
[关键词]:上转换发光技术;免疫层析分析方法;夹心法免疫反应;鼠疫耶尔森氏菌;F1抗原
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国人民解放军军事医学科学院2006年