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动物性食品中醋酸甲羟孕酮及乳酸环丙沙星残留的ELISA检测

李斐菲

  近年来食品中的抗生素、激素残留在国内外已成为一个影响广泛和颇具争议的问题,它与公众的健康息息相关,也直接关系到产业界的经济利益。食品中抗生素、激素的残留水平一般为1μg~1mg或更低,并且检测中的干扰因素多,因此开发简便、高效的样品制备与前处理方法,以及具有高灵敏度和选择性的检测方法是十分必要和紧迫的。本文共分四部分:第一部分概述了动物性食品中兽药残留现状及分析方法的进展,对常用检测方法做了简要概述,最后阐述了本研究工作的目的和意义。第二部分为完全抗原制备及检测,半抗原是相对完全抗原而言,其分子量小,结构简单,缺乏免疫原性,免疫动物不能够刺激动物免疫系统产生抗体,它与载体偶联,才能诱导抗体生成。我们将醋酸甲羟孕酮、乳酸环丙沙星两种小分子药物与牛血清蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联分别得到免疫原及包被原;并采用紫外分光光度法、聚丙稀酰胺凝胶电泳进行鉴定及计算偶联比。第三部分为ELISA检测体系的建立,测定醋酸甲羟孕酮、乳酸环丙沙星的抗血清效价分别为:1∶512000、1∶1024000;实际样品中的ELISA检测,MPA的线性范围为2μg/ml~50μg/ml,最小检测极限为1μg/ml(y=0.8),回收率为50.66%以上,相对标准偏差均小于10.03%,与其他几类激素的交叉反应率均小于0.1%;CIP的线性范围为0.1μg/ml~5μg/ml,最小检测极限为0.05μg/ml(y=0.8),回收率高于57.06%,相对标准偏差均小于9.736%,与其他几类抗生素的交叉反应率均小于0.1%;检测体系保质期为6个月以上。第四部分为两种药物的HPLC检测,对ELISA检测方法进行验证,实验结果证明ELISA检测结果可靠。……   
[关键词]:醋酸甲羟孕酮;乳酸环丙沙星;完全抗原;ELISA;高效液相色谱
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:郑州大学2006年