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HBV转染肝癌细胞和滋养细胞模型的建立

赵艳芳

  目的乙型肝炎病毒(HBV)宿主范围窄,动物模型缺乏,体外组织培养也一直没有多大进展,且不能在体外人工培养,制约了对HBV的研究进展。将HBV DNA转移至靶细胞,建立表达HBV的体外培养细胞模型,对研究HBV生物学特性和肝炎发病机制有重要意义。本研究采用基因转染技术,建立肝癌细胞(HepG2)HBV复制模型,使其分泌HBV,为后续HBV体外感染研究提供病毒样颗粒。我室多年从事HBV宫内感染研究,并提出了HBV感染胎盘的“细胞转移”假说,但具体的细胞机制尚不确切,因此本研究在建立HBV的HepG2细胞模型基础上,以绒毛滋养细胞(HPT-9)为靶细胞建立HBV的细胞模型,为HBV感染胎盘的机制研究提供新的手段。方法1.pcDNA3/3HBV重组质粒的构建:获得HBV全基因亚克隆载体pUC19/3HBV和真核细胞表达载体pcDNA3,酶切及测序鉴定。胶回收3倍HBV基因和线性pcDNA3,然后在T4 DNA连接酶作用下4℃连接。连接产物(pcDNA3/3HBV)酶切鉴定。……   
[关键词]:肝炎病毒;乙型;真核表达质粒;转染;基因表达
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:第四军医大学2006年