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人类乙型肝炎病毒聚合酶反式调节新基因HBVDNAPTP1的克隆表达与部分功能研究

伦永志

  乙型肝炎病毒的持续感染至今仍然是一个全球性的健康问题,不仅引起急慢性病毒性肝炎,而且与肝纤维化、肝细胞癌的发生发展密切相关。然而对于HBV感染目前尚无特效的治疗技术和方法,这主要是由于HBV感染引起的病毒性肝炎发病机制还有诸多方面没有研究清楚。目前认为,HBV进入肝细胞后,病毒基因组及其编码的蛋白与肝细胞基因及蛋白之间的相互作用是决定HBV复制、表达、免疫逃逸、慢性感染、肝纤维化及致恶性转化的关键因素。特别是近年来随着对HBV致病机制研究的深入,发现在HBV与肝细胞相互作用的过程中涉及到复杂的反式调节机制,肝炎病毒蛋白在肝细胞中的表达对于肝细胞的基因表达谱产生影响,这一作用可能与其致病机制有关。寻找肝细胞中与HBV各抗原成分反式调节相关的基因,并进一步弄清具体作用机制、作用效应及连带影响,对明确HBV的致病机制,寻找有效防治方法具有重要意义。对于筛选得到的未知功能基因的克隆表达与功能研究是病毒性肝炎发病机制研究领域中创新知识的重要源泉,同时也是人类基因组计划和后基因组计划的重要内容。利用转染了HBV DNA聚合酶三个功能基因片段表达载体的肝细胞和仅转染空载体的肝细胞为材料,提取其mRNA应用SSH技术研究了HBV DNAP的反式调节靶基因,筛选得到一未知功能基因,经斑点杂交技术验证后,确定其基因编码序列,命名为乙型肝炎病毒DNA聚合酶反式调节蛋白1(GenBank Accession:AY450389)。发现一种新基因,将其编码的新蛋白结构与生物学功能,与生物学和临床医……   
[关键词]:乙型肝炎病毒;DNA聚合酶;反式调节蛋白;酵母双杂交;抑制性消减杂交
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:大连医科大学2006年