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禾谷丝核菌(Rhizoctonia Cerealis)对戊唑醇的抗性机制研究

夏晓明

   本研究以野生敏感型禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)菌株(WW)为材料,经药剂筛选和UV诱导,分别获得了抗戊唑醇(Tebuconazole)禾谷丝核菌菌株(WX1、WX2和WWL)。戊唑醇对3个菌株的EC50值由0.0120μg/mL分别增加到0.1226μg/mL、0.2585μg/mL和0.4004μg/mL,抗性分别为10.2倍、21.5倍33.4倍。 以获得的抗性菌株和敏感菌株为材料,采用菌落直径法和菌丝干重法研究了查彼克(Czapek)培养基中不同营养源、pH值和温度对抗性和敏感菌株生长的影响,以探明抗性菌株和敏感菌株之间生理适合度的差异。发现在不同碳源条件下,所有菌株都在蔗糖、甘油和葡萄糖中生长最快,在木糖和果糖中生长相对较慢;在相同碳源条件下,高抗菌株(WWL)的生长速度小于敏感菌株(WW)和中抗菌株(WX1和WX2),WX1、WX2和WW之间的生长速度差异不明显。在不同氮源条件下,所试菌株均能较好利用硝酸盐、亚硝酸盐、精氨酸和丙氨酸,不能充分利用胱氨酸;在同一氮源条件下,WWL的生长速度小于WW、WX1和WX2,而WX1、WX2和WW之间差异不明显。所有供试菌株在pH值6、7、11、12时生长均较快,在pH值为4和10时生长最慢;当pH值为4时,WWL的菌落直径要明显大于WX1、WX2和WW;当pH为5、11和12时,WWL的菌落直径要明显小于其它菌株,pH值为6、7、8、9和10时,各菌株间菌落直径差异不明显。所有菌株均是在20和25℃时生长速度最快,在10和30℃时生长最慢,基本不能生长。在相同的温度条件下,WWL的菌落直径要相对高于WX1、WX2和WW,但WX1、WX2和WW之间的菌落直径差异不明显。 不同浓度戊唑醇处理抗性与敏感菌株后,体内过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性与抗药性呈一定的相关性。用戊唑醇处理所有菌株,24h内所有菌株的POD活性不断升高,抗性菌株的POD活性明显高于敏感菌株,其中WWL的活性最高;至24 h,用25 mg/L戊唑醇处理后WWL、WX2、WX1和WW的POD活性分别为44.16、30.64、20.56和17.44 u/g·min,均达最高值。PAL活性表现出先迅速上升又迅速下降的趋势,以25 mg/L处理1.5 h时WWL活性最高,达7020 u/g·h;WX2、WX1和WW的PAL活性值也分别为6375、5800和5370 u/g·h;此后所有处理的PAL活性随着时间迅速下降,至24h时达到最低值,各菌株活性大小排列依次为WWL>WX2>WX1>WW。酯酶同工酶和可溶性蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果发现,抗性菌株和敏感菌株无论在谱带数上还是量上都存在明显的差异。……   
[关键词]:禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis);戊唑醇;抗性;机制
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:山东农业大学2006年