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福寿螺纤维素酶的研究

吴海洪

  福寿螺(Pomacea canaliculata)的食道、胃、肝、肠等组织中均含有纤维素酶。福寿螺胃液经50%饱和度硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶过滤层析、Octyl-Sepharose CL-4B疏水层析,得到一种SDS-PAGE电泳均一的纤维素酶,分子量为42.0kD。它水解微晶纤维素、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、木聚糖三种底物的比活力分别为3.5,34.2和177U/mg,分别表示纤维二糖水解酶、内切-β-1,4-葡聚糖酶和内切-β-1,4-木聚糖酶三种活性。它水解CMC-Na的最适温度为45℃,最适pH范围为pH5.0-5.5;水解微晶纤维素和木聚糖最适温度为50℃。最宜pH值范围为5.5-6.0。福寿螺内脏加入缓冲液,匀浆、离心后,上清液选择加入5%体积的壳聚糖溶液(1%)絮凝,离心得到澄清的粗酶液。用壳聚糖溶液絮凝后CMC-Na酶的得率为95.5%。粗酶液中CMC-Na酶、微晶纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和木聚糖酶的酶活性,分别为6.5、0.31、3.1、29.8U/ml。粗酶液用Sephadex G-100凝胶过滤柱层析,以CMC-Na和纤维二糖为底物追踪纤维素酶活力,结果两种底物均显示单一的酶活力峰。所以福寿螺各组织中的纤维素酶活性应该来自同一个纤维素酶系。该酶液水解稻草粉和花生壳粉的活性在40℃最高,水解玉米秸秆粉的活性在45℃最高;而且水解稻草粉和玉米秸秆粉的能力要高于水解花生壳粉。……   
[关键词]:福寿螺;纤维素酶;木聚糖酶;柱层析;分离纯化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:浙江大学2006年