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丝裂霉素诱导原头蚴体细胞凋亡的体外研究

单骄宇

  目的:研究丝裂霉素体外诱导原头蚴体细胞发生细胞凋亡的现象。方法:应用玻璃匀浆器轻研磨法和0.25%胰蛋白酶4℃消化约4~6h后,获得原头蚴体细胞。MTT法筛选出丝裂霉素合适的浓度范围后,按此浓度范围将体细胞分为6组,组间浓度差为10μmol几。应用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳法、荧光显微镜和原位末端标记法(TUNEL法)综合检测不同浓度的丝裂霉素于24h、48h处理原头蚴体细胞后的变化。结果:通过MTT法确定出丝裂霉素的合适浓度范围为40~80μmol/L,并分为6组。体细胞经不同浓度的药物处理24h后,透射电镜下发现在40μmol/L~70μmol/L的各组细胞均有凋亡细胞,细胞核固缩、凝聚,甚至断裂,形成凋亡小体。通过荧光显微镜与TUNEL法检测到50μmol/L和60μmol/L两组的细胞有明显地凋亡形态学改变,以后者细胞发生凋亡的细胞数最多。荧光染色后,计算细胞凋亡率为19.574%,与阴性对照组相比较,p值<0.01。然而,琼脂糖凝胶电泳法未能出现凋亡细胞DNA典型的“梯形带”。48h后,荧光染色计数发现,各组发生凋亡的细胞数有所下降,p值<0.05,仍以60μmol/L的细胞凋亡率最高。结论:提示丝裂霉素可以诱导原头蚴体细胞发生细胞凋亡,其中60μmol/L的药物浓度作用24h后的原头蚴体细胞发生凋亡的效果最佳。……   
[关键词]:丝裂霉素;诱导;原头蚴体细胞;细胞凋亡
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:新疆医科大学2005年