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人工诱导兴国红鲤单性发育研究

朱传忠

  本文以兴国红鲤(Cyprinus carpio var Singuonensis)和银鲫(Crucican carp)为材料,探讨了人工诱导兴国红鲤单性发育的不同途径,同时对单性胚胎发育进行了研究。主要结论如下:1.银鲫精子经紫外线照射后与兴国红鲤卵子受精,再进行休克处理使染色体加倍,获得兴国红鲤雌核发育二倍体。具体方法是:银鲫精子在紫外线照射剂量375mJ/cm~2-750mJ/cm~2,水温20.5℃-21.5℃,分别在受精后1min-3min、受精后21min-39min进行休克处理阻止第二极体排出或抑制第一次有丝分裂,热休克采取40.5℃-41℃处理1min-3min,冷休克4℃-6℃处理20min-40min,结果表明:UV照射剂量为500mJ/cm~2(照射时间20min)对银鲫精子获得最佳灭活效果。受精后2min热休克或冷休克处理,可以诱导出极体雌核发育后代,分别获得10.3%和21.7%的出苗率;受精后27min进行热休克或受精后30min冷休克处理,可成功诱导出有丝分裂雌核发育后代,分别获得1.8%和4.3%的出苗率。极体雌核发育比有丝分裂雌核发育得到更多诱导成活后代,冷休克诱导效果优于热休克。雌核发育后代经染色体数目和形态学鉴定,与母本兴国红鲤表型一致。2.银鲫卵子遗传失活与兴国红鲤成熟精子受精后经热休克处理,获得雄核发育二倍体克隆鱼。UV以38mJ/cm~2-190mJ/cm~2剂量分别照射浸泡在3种不同卵子保存液中的银鲫卵子,孵化水温19℃-21℃时,受精后24min-72min(每3min为一个梯度)进行热休克处理,将受精卵置于40.5℃-41℃温水中处理2min,以阻止第一次有丝分裂。结果表明:UV照射剂量为76mJ/cm~2、使用EM卵子保存液时卵子获最佳灭活效果,单倍体诱导率达到57.2%;二倍化休克处理的时间在距受精后24min-42min和63min-72min出现二个诱导高峰,其中受精后27min获得20h时胚胎存活率47.3%和出苗率5.7%。经过形态学和染色体数目鉴定,诱导后代与父本兴国红鲤表型一致。3.热休克人工诱导出兴国红鲤雄核发育、雌核发育单倍体、二倍体胚胎,在水温20.5℃-21.5℃下连续观察各种胚胎发育的时序及形态变化特征,并与鲤自交后代胚胎发育进行比较。结果发现:单倍体胚胎与二倍体胚胎的各期形态特征相似,发育时序延……   
[关键词]:兴国红鲤;人工诱导;雄核发育;雌核发育;胚胎发育
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2005年